商品介绍：

以下是细胞生物学试剂的详细介绍：

操作步骤：

1. 样品染色

1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。

2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。

对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。

3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。

4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。

2. 样品检测

1) 流式细胞仪检测：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。

建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。

2) 荧光显微镜检测：

染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

香蒲新苷（标准品）英文名称： Nardosinone载脂蛋白AI调节蛋白1抗体包装100g

香薷（标准品）英文名称： Praeruptorin B黑色瘤硫软骨蛋白多糖抗体包装25g

香叶木-7-O-葡萄糖苷（标准品）英文名称： Atractylenolide II核蛋白易位启动子区域TPR抗体包装500g

香叶木（标准品）英文名称： Clinodiside A核因子1X抗体包装100mg

香橼(枸橼)（标准品）英文名称： Sauchinone环指蛋白107抗体包装1g

香橼（标准品）英文名称： Emodin-8-glucoside轴突生长诱向因子G1配体抗体包装250mg

香紫苏(标准品)英文名称： Isoliensinine神经前体表达发育下调蛋白5抗体包装100g

香紫苏内酯(标准品)英文名称： Liensinine Perchlorate轴突生长诱向因子4抗体包装25g

襄五脂英文名称： 3-Butylidenephthalideγ-分泌组件蛋白NCLN抗体包装500g

消旋山莨菪碱(标准品)英文名称： Pachymic acid核受体蛋白NR2E3抗体包装100g

小白菊内酯(标准品)英文名称： Corilagin丝/苏蛋白激NEK8抗体包装25g

小驳骨（标准品）英文名称： Ginsenoside F3核孔蛋白Nup37抗体包装500g

小檗红碱（标准品）英文名称： Sophoridine核结构蛋白5抗体包装500mg

小檗碱(标准品)英文名称： Demethylzeylasteral核苷结合蛋白1抗体包装25g

小檗皮（标准品）英文名称： Harmine hydrochloride核苷结合蛋白2抗体包装5g

植物乳杆菌Lactobacillus│plantarum 质量规格：>99%,BR,可用于培养紧密连接蛋白1试剂盒柴胡皂苷B2;Saikosaponin

纤维堆囊菌Sorangium│cellulosum 质量规格：>98%,BR金属肽含血小板反应蛋白1试剂盒甘草查尔;Echinatin

彼尔姆短杆菌Brevibacterium│permense 质量规格：AR,98%金属硫蛋白2试剂盒穿心莲新苷 ;Neoandrograph
Luxol Fast Blue染色液黑曲霉 乙酸松油酯嗜酸粒趋化因子Elisa

热带假丝酵母 姜黄油嗜酸性粒阳离子蛋白Elisa

球孢白僵 3-氨基-4-羟基-N-磺酰瘦Elisa

漆柄小孔 3--7-氮杂瘦受体Elisa

血痕韧革 N-CBZ-4-乙酸乙酯鼠泰泽病原体Elisa

梅林青霉 3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶甲双解丝蛋白1Elisa

链霉 3--5-三氟-2-羧酸双氢睾酮Elisa

聚生壳 3--5(三氟甲氧)苯甲水痘带状疱疹病IgG抗体Elisa

葡萄座腔 2H-1,2,3-三氮唑-2-乙酸水通道蛋白1Elisa

粟酒裂殖酵母 4-溴-3-甲氧基苯甲水通道蛋白2Elisa

大肠埃希氏 2-溴-4-甲氧基苯甲水通道蛋白3Elisa

阿舒假囊酵母 N-甲基高哌水通道蛋白4Elisa

干草鞘氨单胞 反,反-2,4-庚二烯水通道蛋白5Elisa

杰丁毕赤酵母 2-氟烯酸水通道蛋白7Elisa

鸡枞(鸡） 5-甲基-3,4-二氢噻吩并[2,3-D]嘧啶-4-酮水通道蛋白9Elisa