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培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
产品属于:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Senescence β-Galactosidase Staining Kit | >100次 | 1~3天 |
商品介绍:
本试剂盒是一种基于衰老时SA-β-Gal(senescence-associated β-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测,也可以用于组织切片的衰老检测。 |
试剂盒组份:
β-半乳糖苷酶染色固定液—————100ml
X-Gal溶液————————————5ml
β-半乳糖苷酶染色液A——————1ml
β-半乳糖苷酶染色液B——————1ml
β-半乳糖苷酶染色液C——————100ml
绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力,在不能分裂后就进入衰老(senescence)状态。此时细胞仍然是存活的,但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。衰老(senescence)的细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂,并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊,不同于一些损伤诱导的细胞休眠,也不同于细胞生长接触抑制的情况。衰老细胞细胞通常体积变大,表达pH 6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式,同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。
本细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒,以X-Gal为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物。从而在光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
头孢匹林钠(标准品)英文名称: GeniposideDYX1C1蛋白抗体包装5g
头孢羟苄 (标准品)英文名称: GeniposideE3泛蛋白连接dzip3抗体包装1g
头孢曲松钠(标准品)英文名称: 17-Methyltestosterone三磷腺苷依赖解旋DDX23抗体包装250mg
头孢噻吩(标准品)英文名称: Tetrahydro-L-Biopterin free base多能发育相关基因5抗体包装5g
头孢噻呋钠(标准品)英文名称: Tirofiban HCl三磷腺苷依赖解旋DDX3抗体包装100mg
头孢噻肟钠(标准品)英文名称: Tirofiban HCl磷化三磷腺苷依赖解旋DDX3抗体包装1g
头孢妥仑匹酯(标准品)英文名称: Pullulan迪格弗-梅尔基奥尔-克劳森综合征相关蛋白抗体包装500mg
头孢西丁钠(标准品)英文名称: Vitamin E,dl-α-tocopherol双氧化激活因子2抗体包装5g
头孢西丁(头孢西丁)(标准品)英文名称: StavudineRNA结合泛连接DZIP3抗体包装100mg
头孢唑啉(标准品)英文名称: Stavudine二氢二脱氢1/2抗体包装500mg
头孢唑啉钠(标准品)英文名称: Moclobemide形态发生紊乱关联激活因子2抗体包装1g
头孢唑肟(标准品)英文名称: Moclobemide质分裂付出蛋白2抗体包装5g
头孢唑肟钠(标准品)英文名称: Astragaloside IV质分裂付出蛋白4抗体包装1g
土拉霉A(标准品)英文名称: Astragaloside IV质分裂付出蛋白5抗体包装250mg
褪黑,松果体(标准品)英文名称: Nateglinide淋巴抗原75抗体包装50ml
: D8(1957)资源名称: 伤门氏菌 质量规格:>99%,BR维生D2试剂盒四氢小檗碱;Tetrahydroberb
大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格:HPLC>98%,标准品维生C试剂盒苏木;Hematoxylin
胶孢刺盘孢Colletotrichum│gloeosporioides 质量规格:>98.5%,USP,可用于培养维生B6试剂盒双醋瑞因;1,8-Diacetoxy-3
细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒溴化铜
其他 二溴化铜;二溴化铜(II)
英文名称: Cupric bromide
其他英文名称: Copper(II) bromide; Copper bromide
产品规格: AR,98.5%
包装:250克
CAS号:7789-45-9
CuBr2=223.35
级别:AR
含量:98.5~100.5%
氯化物:≤0.2%
硫盐:≤0.015%
水不溶物:≤0.01%
铁:≤0.01%
碱金属及碱士金属:≤0.2%
性状:黑色似碘片的单斜结晶或结晶性粉末。易吸湿。易溶于水,溶于乙、和水,几乎不溶于和浓硫。相对密度(d204 )4.71。熔点498℃。沸点900℃。
用途:生化研究。分析试剂。有机合成溴化剂。乙酰化聚甲醛稳定剂。湿度指示剂。
保存:RT,避光