深圳艾瑞斯生产的甲砜霉素检测试剂盒原理及用途

本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测畜禽组织、蜂蜜、鸡蛋样本中的甲砜霉素（Thiamphenicol，TAP），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样本溶液，样本中的甲砜霉素药物和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗甲砜霉素药物抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含甲砜霉素药物含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中甲砜霉素药物的残留量。

甲砜霉素检测试剂盒技术指标

2.1 试剂盒灵敏度：0.5ppb(ng/ml)

2.2 反应模式：25℃，30min～15min

2.3 检测下限：

组织、蜂蜜……………………………0.25ppb

鸡蛋……………………………………1ppb

2.4 交叉反应率：

甲砜霉素………………………………100%

氟苯尼考………………………………36.4%

氯霉素…………………………………308%

 2.5 样本回收率：

组织……………………………………85%±20%

蜂蜜……………………………………85%±25%

鸡蛋……………………………………85%±25%

3 试剂盒组成

酶标板……………………………96孔

标准液：各1ml

0ppb、0.5ppb、1.5ppb、4.5ppb、13.5ppb、40.5ppb

高标准液（红盖）：100ppb…………1ml

酶标记物（红盖） …………………5.5ml

抗体工作液（蓝盖） ………………5.5ml

底物液A（白盖）……………………6ml

底物液B（黑盖）……………………6ml

终止液（黄盖）………………………6ml

20×浓缩洗涤液（白盖）……………40ml

2×复溶液（黄盖）…………………50ml

说明书…………………………………1份

盖板膜…………………………………1张

自封袋…………………………………1个

酶联免疫试验步骤

    将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

1 编    号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

2 加样反应：加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50µl/孔，加抗体工作液50µl/孔，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光反应30分钟。

3 洗    涤：小心揭开盖板膜，甩去孔内液体，每孔加350ul工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，最后一次拍干。（用吸水纸拍干，拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。

4 显    色：加底物液A 50µl/孔，再加底物液B 50µl/孔，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。

7 终    止：每孔加入终止液50µl，轻轻振荡混匀，终止反应。

8 测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成