艾瑞斯 品牌
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一、羊小反刍兽疫病毒抗体ELISA检测试剂盒
通用名:羊小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Goat Peste des Petits Ruminants Virus (ELISA)
二、包装规格 96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
三、预期用途
小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)引起的一种急性接触性传染病,其特征为口腔、舌粘膜糜烂、流泪、流鼻液。本病的易感动物为山羊,也可感染绵羊、白尾鹿等,但对牛无感染性。
用于检测羊血清中小反刍兽疫病毒抗体,可用于小反刍兽疫疫苗免疫效果评价。
四、试剂盒原理
羊小反刍兽疫病毒抗体ELISA检测试剂盒系由预包被小反刍兽疫病毒重组抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测羊血清、血浆样本中小反刍兽疫病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有小反刍兽疫病毒抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有小反刍兽疫病毒抗体。
五、羊小反刍兽疫病毒抗体试剂盒组成
酶标板、酶标记物、样品稀释液、浓缩洗涤液、底物液A、底物液B、阳性对照、阴性对照
六、储存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期为12个月。
包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.待检血清样本恢复室温、混匀待用。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水+1份浓缩洗涤液)。
【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照50μl;样品孔每孔先加入40μl工作洗涤液,再加入10μl血清样本。
4.每孔加抗体工作液50μl,混匀,盖好盖板膜,置37℃(推荐水浴)避光反应30分钟。
5.甩去孔内液体,每孔加350μl工作洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,最后一次拍干。
6.每孔加酶标记物100μl,盖好盖板膜,置37℃避光反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,盖好盖板膜,置37℃避光反应15分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
【参考值】实验正常的情况下,阴性对照吸光值≥1.0,阳性对照吸光值≤阴性对照吸光值×50%。
【检验结果的解释】
1. PI(阻断率)=(1- )×100%,PI≥50%为阳性;PI<50%为阴性。
2.本实验结果为阴性表明羊只抗体水平不足,建议补打相应疫苗。