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一、沙丁胺醇快速检测试剂盒概要
沙丁胺醇(salbutamol),一种短效β2肾上腺素能受体激动剂,用作平喘药。添加微量沙丁胺醇于牲畜饲料内,可以增加牲畜的瘦肉量及换肉率、减少脂肪,但是其毒性远高于具有相同功能的莱克多巴胺。因而被禁止大量使用。沙丁胺醇检测试剂盒应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、沙丁胺醇快速检测试剂盒原理
沙丁胺醇检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测尿样、组织、饲料等样本中的沙丁胺醇(Salbutamol,Sal),试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时,加入标准品或样品溶液,样本中的沙丁胺醇和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗沙丁胺醇抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含沙丁胺醇含量成负相关,与标准曲线比较即可得出样本中沙丁胺醇的残留量。
三、技术指标
1 试剂盒灵敏度:0.1ppb(ng/ml)
2 反应模式:25℃,30min~15min。
3 检测下限:
尿液样本:0.1ppb 组织样本:0.1ppb 饲料样本:1ppb
2.4 交叉反应率:
沙丁胺醇:100% 克伦特罗:3.6% 盐酸多巴酚丁胺:7.2% 西马特罗:0.1% 莱克多巴胺:0.1%
2.5 样本回收率:
尿样:90%±10% 组织:80%±10% 饲料:80%±15%
四、沙丁胺醇快速检测试剂盒组成
酶标板、标准液、高标准液、酶标记物、抗体工作液、底物液A、底物液B、终止液、20X浓缩洗涤液、10X复溶液
五、贮藏及保存期
储藏条件:试剂盒于2-8℃保存,不要冷冻。
保 质 期:该产品有效期为1年,生产日期见包装盒。
酶联免疫试验步骤
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
1 编 号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
2 加样反应:加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反应30分钟。
3 洗 涤:小心揭开盖板膜,甩去孔内液体,每孔加350ul工作洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,最后一次拍干(用吸水纸拍干,拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。
4 显 色:每孔加入底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟(若蓝色过浅,可适当延长反应时间)。
5 终 止:每孔加入终止液50µl,轻轻振荡混匀,终止反应。
6 测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应在终止反应后10分钟内完成。