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一、牛包虫病抗体ELISA检测试剂盒
通用名:牛包虫抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Bovine Hydatid Disease(ELISA)
二、包装规格 96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒
三、预期用途 包虫病( Hydatid, 英文缩写HYD)又称棘球蚴病,是人感染细粒棘球绦虫及多房棘球绦虫的幼虫所致的慢性寄生虫病。
牛包虫抗体检测试剂盒用于检测牛血清中包虫抗体,可用于包虫疫苗免疫效果评价或该病的辅助诊断。
四、试剂盒原理
牛包虫抗体检测试剂盒由预包被包虫抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测牛血清、血浆样本中包虫抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有包虫抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶标结合物反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有包虫抗体。
五、牛包虫病抗体ELISA检测试剂盒组成
酶标记物、稀释液、洗涤液、底物A/B液、终止液、阴/阳性对照、酶标板、盖板膜、稀释板
六、储存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期为12个月。
包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为12个月。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清先按10倍稀释(如在稀释板中加入90μl样品稀释液再加10μl血清,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水+1份浓缩洗涤液)。
【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入样品稀释液90μl,再加入稀释后的血清10μl。
注:样本稀释比例相当于1:100。
4.混匀,盖好盖板膜,置37℃(推荐水浴)避光反应30分钟。
5.扣去孔内液体,每孔加350μl工作洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,最后一次拍干。
6.每孔加酶标记物100μl,盖好盖板膜,置37℃避光反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,盖好盖板膜,置37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。