艾瑞斯 品牌
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一、牛羊口蹄疫病毒A/O型抗体检测试剂盒
通用名:牛羊口蹄疫病毒A/O型抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Bovine and sheep Foot and Mouth Disease Virus A/O (ELISA)
二、包装规格 96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒
三、预期用途 口蹄疫是由口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病,其特征为口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤发生水泡和烂斑。
用于检测牛羊血清中口蹄疫病毒A/O型抗体,可用于口蹄疫病毒A/O型疫苗免疫效果评价。
四、原理
牛羊口蹄疫病毒A/O型抗体检测试剂盒由预包被口蹄疫病毒A/O型抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测牛羊血清样本中口蹄疫病毒A/O型抗体。实验时在酶标板中加入待检样本和抗体工作液,经温育后洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,若样品中含有口蹄疫病毒A/O型抗体则将阻断抗体工作液与酶标板上抗原结合,从而使后续反应不出现显色;反之则出现显色;显色深浅与样品中的特异性抗体含量成负相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值, 即可知样品是否含有口蹄疫病毒A/O型抗体。
五、牛羊口蹄疫病毒A/O型抗体试剂盒组成
酶标板、酶标记物、浓缩洗涤液、底物液A、底物液B、阳性对照、阴性对照
六、储存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期为12个月。
包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为12个月。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.待检血清样本恢复室温、混匀待用。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水+1份浓缩洗涤液)。
【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照50μl;样品孔每孔先加入45μl工作洗涤液,再加入5μl血清样本。
4.每孔加抗体工作液50μl,混匀,盖好盖板膜,置37℃(推荐水浴)避光反应30分钟。
5.甩去孔内液体,每孔加350μl工作洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,最后一次拍干。
6.每孔加酶标记物100μl,盖好盖板膜,置37℃避光反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,盖好盖板膜,置37℃避光反应15分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
【参考值】 实验正常的情况下,阴性对照吸光值≥0.8,阳性对照吸光值≤阴性对照吸光值×50%。