一、盐酸克伦特罗检测试剂盒概要

克伦特罗(瘦肉精)是一种肾上腺受体激动剂即神经兴fen剂。80年代末期发现其对家畜具有促进生长，降低脂肪，提高瘦肉率的功效，曾被作为饲料添加剂使用。然而，90 年代初期以来，出现多起克伦特罗(瘦肉精)中毒事件，并出现了死亡案例，因此被禁止使用。克伦特罗快速检测试剂盒采用直接竞争酶联免疫一步法，可对尿液、饲料、肉类组织中的克伦特罗进行快速定量检测。

二、盐酸克伦特罗检测试剂盒原理

克伦特罗检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测尿样、组织、饲料等样本中的盐酸克伦特罗（Clenbuterol Hydrochloride，Cle），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的盐酸克伦特罗和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗盐酸克伦特罗抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含盐酸克伦特罗含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中盐酸克伦特罗的残留量。

三、使用范围

克伦特罗检测试剂盒可定性、定量检测动物组织（肌肉、肝脏等）、尿液、饲料、牛奶等样品中克仑特罗的残留量。

四、技术指标

1 试剂盒灵敏度：0.1ppb(ng/ml)

2 反应模式：25℃，30min～15min。

3 检测下限：

尿液样本:0.1ppb  组织样本:0.1ppb  饲料样本:1ppb

4 交叉反应率：

克伦特罗（Clenbuterol）:100%   马布特罗（Mabuterol）:<1%  特普他林（Terbutalin）:<1%     溴布特罗（Brombuterol）:<1%

沙丁胺醇（Salbutamol）:<1%   莱克多巴胺（Ractopamine）:<1%

5 样本回收率：

尿样:95%±10%   组织:85%±15%  饲料:85%±15%

五、克伦特罗检测试剂盒组成

酶标板、标准液、高标准液、酶标记物 、抗体工作液、底物液A、底物液B、终止液、20X浓缩洗涤液、10X复溶液

六、贮藏及保存期

储藏条件：试剂盒于2-8℃保存，不要冷冻。

保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。

样本前处理步骤：

尿样处理方法：

    取1ml清亮尿样（浑浊尿样需要过滤或经4000r/min离心5min以得到清亮尿样）于10ml离心管中，加入1ml复溶液（配液1），混合振荡30s，取50µl进行分析。暂不使用的样本应冷冻保存。

样本稀释倍数：2   检测下限：0.1ppb

组织样本处理方法：

   称取均质后的组织样本1g±0.05g，加入3ml复溶液（配液1），充分振荡2min，室温4000r/min以上离心10min (若组织样本中油脂含量较高，可在振荡后放入85℃水浴10min后再离心)。取50µl上清液进行分析。

样本稀释倍数：4    检测下限：0.2ppb

饲料样本处理方法：

1）称取粉碎后的饲料样本1g±0.05g于15ml离心管中，加入4ml样本提取液(配液3)，振荡混匀2min，室温 4000r/min以上离心10min；

2）取上清液0.1ml于1.5ml离心管中，再加入0.4ml复溶液(配液1)，振荡混匀30s，取50ul分析。

样本稀释倍数：20    检测下限：1ppb

猪肝样本处理办法

1)称取均质后的猪肝样本1g±0.05g于15ml离心管中，加入1ml 10%碳酸钠溶液（配液4）,振荡混匀2min，加入4ml乙酸乙酯溶液，振荡混匀5min，室温4000r/min以上离心10min；

2）取上层有机液2ml于15ml离心管中，加入1ml 0.1M盐酸溶液（配液5），振荡混匀2min，室温4000r/min以上离心5min；

3）取下层清液0.1ml于1.5ml离心管中，加入0.4ml复溶液（配液1），用2M 氢氧化钠溶液（配液6）调PH至 7 左右，取50ul分析。