磷酸烯醇式酸羧化酶（PEPC）活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号：BC2190
规格：50T/48S

产品说明：
磷酸烯醇式*酸羧化酶（EC 4.1.1.31）广泛存在于植物和微生物中，在动物及丝状霉菌中缺乏此酶。是催化 磷酸烯醇式*酸与二氧化碳反应生成草酰乙酸呈不可逆反应的酶，同时也是 C4 植物和 CAM 植物固定 CO2 的 关键酶，对三羧酸循环的运转起重要调节作用。 PEPC 催化磷酸烯醇式*酸和 CO2 生成草酰乙酸和 HPO4 2-，苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和 NADH 生 成苹果酸和 NAD+，在 340nm 测定 NADH 减少速率，计算 PEPC 活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL 石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰 和蒸馏水。

注意事项：

1. 为保证实验结果的准确性，需先取 1-2 个样做预实验，ΔA 大于 0.6 时，建议将粗酶液用提取液稀释后再进行测定，当 ΔA 小于 0.01 时，可以延长反应时间（10min 或 15min）来测定。

2.  空白管为检测各试剂组分质量的检测孔，正常情况下，变化不超过 0.02。

参考文献：
[1] Zhang Y H, Wang Z M, Huang Q, et al. Phosphoenolpyruvate carboxylase activity in ear organs is related to protein concentration in grains of winter wheat[J]. Journal of cereal science, 2008, 47(2): 386-391.
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