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产品详细介绍:
储存条件:冷冻(-20℃) 技术规格 Band 200,400,600,800,1000,1500,2000,2500,3000,4000,5000,6000,8000,10037 bp Storage Buffer 10mMTris-HCl(pH 8.0),1.0 mM EDTA,0.033%bromophenol blue,0.008%xylene cyanoland 10%glycerol. |
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中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
DNA Ladder Q (250~10001bp) | 100次 | GOY-F10139 |
DNA提取流程图:
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
兔载脂蛋白E(Apo-E)ELISAKit 6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one 43200-81-3 中文名: 分子式:C11H7ClN4O2
兔载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 5α-Androstanedione 846-46-8 中文名:5α-雄甾烷二酮 分子式:C19H28O2 度:98.0% 关键词:
兔载脂蛋白B100(apo-B100)ELISAKit 5α-Androstanedione 中文名:5α-雄甾烷二酮 分子式:C19H28O2 度:98.0%
兔载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒 5α-Androstanedione 846-46-8 中文名:5α-雄甾烷二酮 分子式:C19H28O2
兔载脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit 6-Chloroguanine riboside 2004/7/1 中文名:6-氯鸟嘌呤核苷 分子式:C10H12ClN5O4
石英砂(AR,6-10目或2-3mm) Sand 质量规格:AR,6-10目或2-3mm 人幽门螺旋杆菌IgM(Hp-IgM)ELISA检测试剂盒HumanHelicobacterpyloriIgM,Hp-IgMELISAKit 96T/48T
石英砂(AR,8-16目或1-2mm) Sand 质量规格:AR,8-16目或1-2mm 大鼠循环复合物(CIC)试剂盒 Rat circulating immune complex,CIC ELISA Kit
二氢铵(SP) Ammonium phosphate monobasic 质量规格:SP 英文名称RatmajorhistocompatibilitycomplexELISAKit大鼠组织相容性复合物(MHC)规格:96T/48T
二甲基亚砜(光谱级,>99.9% (GC)) Dimethyl sulfoxide 质量规格:光谱级,>99.9% (GC) 钙离子膜通道钙泵(F型ATP酶/线粒体、叶绿体)功能荧光检测试剂盒20
N,N-二甲基乙酰胺(光谱级,≥99.8%(GC)) N-N-Dimethylacetamide 质量规格:光谱级,≥99.8%(GC) ELISAKitLp-α人脂蛋白α规格:48T/96T
二甲基亚砜(ACS,光谱级) Dimethyl sulfoxide 质量规格:ACS,光谱级 小鼠细胞抗原75(LY75)ELISA试剂盒 ,英文名: LY75 ELISA Kit
乙二(光谱 ,≥99%) Ethylene glycol 质量规格:光谱 ,≥99% 人脂肪酶(Lipase)ELISA检测试剂盒HumanLipaseELISAKit 96T/48T
甘油(for spectroscopy,≥99.5%) Glycerol in water for HPLC verification 质量规格:for spectroscopy,≥99.5% 大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)试剂盒 Rat Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit
(SP) Lithium carbonate 质量规格:SP 英文名称RatmajorhistocompatibilitycomplexELISAKit大鼠组织相容性复合物(MHC)规格:96T/48T
新亚铜试剂盐酸盐一水合物(99%) Neocuproine monohydrate 质量规格:0.99 钙离子膜通道钙泵PMCA(P型ATP酶/质膜)功能荧光检测试剂盒20
DNA Marker Q(250~10001bp)组织EPHB4激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
细胞EPHB4激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
组织EPHB3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
细胞EPHB3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
组织EPHB2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。