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下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
PCR Master Mix (Orange, 2X) | 400次|2000次10000次 | GOY-F10282 |
产品详细介绍：
本品是含有橙色染料(电泳位置约50bp)的2倍浓度的PCR预混液，含有2X Taq DNA Polymerase、2X PCR Buffer、2X dNTP和2X Loading Buffer，只需加入模板DNA、引物和水即可进行PCR扩增，并且扩增完毕后可以直接上样电泳。主要适用于cDNA或基因组DNA等的常规PCR扩增，特别适合于定性或半定量的PCR扩增，也可用于长度小于2kb的DNA片段的扩增和克隆。 本品中已经含有所有的通用组分，用户只需自备引物、模板DNA和水即可进行PCR扩增。大大简化了PCR操作，使操作更加快捷，也减少了PCR操作过程中可能导致的污染，使PCR的重复性更好。可以扩增出长达8kb的片段，但通常更适合用于扩增2kb以下的DNA片段。 本产品中加入了橙色的电泳示踪染料，其在浓度为1%琼脂糖胶中的迁移位置大约位于50bp处。PCR结束后可直接进行电泳检测，无需再添加上样缓冲液。橙色示踪染料不会影响对相应DNA条带的观察和检测。 本产品反复冻融15次前后扩增不同长度产物的效果图。A. 反复冻融前本产品进行PCR的扩增结果。B.反复冻融15次后的本产品进行PCR的扩增结果。除本产品是否反复冻融15次外，A和B的反应体系*相同，电泳的上样量也相同。 储存条件：-20℃，有效期一年。 |
DNA提取流程图：
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISAKit 3-(tert-Butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic acid 中文名： 分子式：C17H23NO5
人多药耐药相关蛋白1(MRP1)酶联吸附测定试剂盒 Human MRP1 (Multidrug Resistance Associated Protein 1) ELISA Kit 2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate 中文名： 分子式：C19H14F2O6 度：98.0%
人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISAKit Timosaponin B-II 中文名：知母皂苷B-II 分子式：C45H76O19
人抵抗素(Resistin)ELISAKIT 3,4-Didehydrosapriparaquione 142763-37-9 中文名： 分子式：C20H24O3
人单疱疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISAKit 3-(Hydroxymethyl)-3-nitro-1-(4-octylphenyl)-1,4-butanediol 899822-99-2 中文名： 分子式：C19H31NO5
α-酮戊二酸(标准品) 2-Ketoglutaric acid 质量规格：>98%,标准品 PlaVitaminB6,VB6ELISA试剂盒植物B6(VB6)ELISA试剂盒规格：96T/48T
α-酮戊二酸 2-Ketoglutaric acid 质量规格：>99%,BR 小鼠基质金属蛋白酶8(MMP8)ELISA试剂盒 ，英文名： MMP8 ELISA Kit
卡博替尼 ;XL184 Cabozantinib(BMS907351) 质量规格：>99%,广谱酪激酶抑制剂 人鞘0脂(SM)ELISA检测试剂盒Humansphingomyelin,SMELISAKit 96T/48T
D-丝乙酯盐酸盐 H-D-SER-OET HCL 质量规格：>98% 大鼠纤维蛋白原(Fb)试剂盒 Rat Fibrinogen,Fb Elisa Kit
马来酸阿森那平 Asenapine Maleate 质量规格：>99% 英文名称RatAngiogeninELISAKit大鼠血管生长素(Angiogenin)规格：96T/48T
三苯甲基坎地沙坦西来替昔酯 Trityl candesartan cilexetil 质量规格：>99% 果菜比色法定量检测试剂盒20
他莫昔芬 Tamoxifen 质量规格：>99%,BR ELISAKitHbCO人血红蛋白规格：48T/96T
头孢替安盐酸盐 Cefotiam 质量规格：>800 µg/mg,USP 小鼠基质金属蛋白酶7(MMP7)ELISA试剂盒 ，英文名： MMP7 ELISA Kit
头孢替安盐酸盐(标准品) Cefotiam 质量规格：效价测定 人酸性0酸酶(ACP)ELISA检测试剂盒HumanAcidPhosphatase,ACPELISAKit 96T/48T
络塞定（标准品） (2E,4S)-4-Hydroxy-3,7-dimethyl-2,6-octadien-1-yl beta-D-glucopyranoside 质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)试剂盒 Rat Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit
2×PCR Master Mix (含橙色染料)真菌/酵母酶（glutaminase）活性比色法（405）定量检测试剂盒
细菌酶（glutaminase）活性比色法（405）定量检测试剂盒
植物酶（glutaminase）活性比色法（405）定量检测试剂盒
组织酶（glutaminase）活性比色法（405）定量检测试剂盒
细胞酶（glutaminase）活性比色法（405）定量检测试剂盒
