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产品详细介绍:
本品是由BaldStar Taq DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs(含dUTP)、UNG酶以及PCR稳定剂等组成的PCR预混体系。使用本产品无需进行繁杂的PCR反应条件的优化过程,只需进行简单的条件摸 索即可轻松进行多重PCR反应。 ??本产品所含的BaldStar Taq DNA Polymerase是经化学修饰的热启动酶,可以有效 减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异扩增。*的缓冲体系,使多重PCR反 应所有的引物都能有效延伸,无需额外优化。此MasterMix中还包含GC Enhancer,有 助于实现“困难”模板(比如,高GC含量的模板)的高效扩增。本产品运用dUTP-UNG 防污染系统,可有效去除了PCR产物的残留污染,大大降低了由于扩增产物污染而导 致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活,因此不会影响新的含dU 碱基PCR产物的形成。 ??本品可有效防止PCR产物的残留污染,适用于防污 染多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。 |
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
Multiplex PCR MasterMix(UNG) | 1ml | GOY-F10309 |
DNA提取流程图:
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
可溶性ENG/sCD105 英文名称: Human soluble Endoglin 规格: 48T/96T 英文缩写: ENG/sCD105 Paroxetine 中文名:盐酸 分子式:C19H21ClFNO3
颗粒体蛋白Granulin 英文名称: Granulin 规格: 48T/96T 英文缩写: GRN 3-O-Acetylandrostenone hydrazone 122914-94-7 中文名:3-O-乙酰基雄酮腙 分子式:C21H32N2O2
抗紧张素‖受体︱型自身抗体 英文名称: Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies 规格: 48T/96T 英文缩写: AT1R-AA 3-Amino-4-methylbenzamide 中文名:3-氨基-4-甲酰胺 分子式:C8H10N2O 度:98.0%
抗紧张素‖受体︱型自身抗体 英文名称: Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies 英文缩写: AT1R-AA 规格: 48T/96T Ophiopogonin D 中文名:麦冬皂苷D 分子式:C44H70O16
抗酸性0酸酶(SACP)试剂盒(比色法) Repaglinide 135062-02-1 中文名: 分子式:Repaglinide 度:98.0% 关键词:
氨力农(标准品) Amrinone 质量规格:HPLC>98%,标准品 ELISAKitGP-ⅡbⅢa人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa规格:48T/96T
角叉菜胶;卡拉胶 Carrageenan 质量规格:BR 小鼠肌球蛋白重链2(MYH2)ELISA试剂盒 ,英文名: MYH2 ELISA Kit
牛磺胆酸-3-硫酸酯二钠盐 Taurocholate-3-sulfate,di salt 质量规格:>90%,BR 人胃泌素细胞抗体(GCA)ELISA检测试剂盒Humangasincellaibody,GCAELISAKit 96T/48T
FLAG peptide FLAG peptide 质量规格:>95%,BR 大鼠细胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)试剂盒 Rat Cytokeratin 18-M30,CK 18-M30 ELISA kit
十一烯酸锌 Zinc undecylenate 质量规格:>98% 英文名称RatCardiolipinIgA(ACAIgA))Elisakit大鼠心0脂抗体CardiolipinIgA(ACAIgA)规格:96T/48T
羽扇豆鹼(标准品) lupanine 质量规格:HPLC≥97%,标准品 过氧亚硝基阴离子解构剂FeTMPyPpeachloride1毫升
普卢利;普利 Prulifloxacin 质量规格:>99%,BR ELISAKitPBP/CXCL7人血小板碱性蛋白规格:48T/96T
普卢利;普利(标准品) Prulifloxacin 质量规格:HPLC>98%,标准品 小鼠肌球蛋白重链1(MYH1)ELISA试剂盒 ,英文名: MYH1 ELISA Kit
5-HIAA;5-羟基吲哚-3-乙酸(血清素代谢物) 5-HIAA 质量规格:>98.0%,进分 人纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA检测试剂盒Humanfibronectioelatedaigen,FRAELISAKit 96T/48T
头孢地嗪酸;头孢地嗪酸 Cefodizime acid 质量规格:>90%,BR 大鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3)试剂盒 Rat iercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit
防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)细胞单胺氧化酶A型(MAO-A)活性化学发光法定量检测试剂盒
体液单胺氧化酶(MAO)总活性化学发光法定量检测试剂盒
组织单胺氧化酶(MAO)总活性化学发光法定量检测试剂盒
细胞单胺氧化酶(MAO)总活性化学发光法定量检测试剂盒
体液单胺氧化酶B型(MAO-B)活性荧光定量检测试剂盒
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。