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下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
BloodTaq DNA Polymerase | 2500U | GOY-F10308 |
产品详细介绍：
本品是通过缺失Taq DNA Polymerase N端一段氨基酸和突变改造得到的新型DNA聚合酶。通过改造后使本产品能够全血中存在的抑制剂产生耐受作用，能够直接扩增人和小鼠全血样品中的DNA而无需事先对基因组进行提取和纯化。PCR产物3’端为A，可直接用于T/A克隆。 注意： a.PCR仪于94-95℃预热，将样品放置于PCR仪上开始循环。 b.BloodTaq提高了冷敏感性，具备了一些热启动特性。通常可以通过在冰上配制反应成分、后加入聚合酶以及将热循环仪预热至变性温度(95℃)后立即进行反应来避免非特异性产物的产生。 c.变性温度与时间：在PCR循环前为了充分裂解血液细胞和释放/变性DNA，要求初始变性为95℃ 5分钟。 d.退火温度与时间:退火时间通常为30秒-1分钟。退火温度可以低于理论退火温度(Tm)5℃开始，通过梯度PCR进行优化。 e.延伸时间：延伸反应通常在72℃下进行。一般每250-500 bp延伸时间为1分钟。推荐72℃ 10分钟进行终延伸。 f.通常35-40个循环可以达到优扩增。 5、结果检测：反应结束后取5μl反应产物并加上电泳缓冲液一起电泳检测结果。 储存条件：-20℃，避免反复冻融。 |
DNA提取流程图：
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
可溶性细胞表面分化抗原40配体 英文名称： Soluble Cluster of differeiation aigen 40 ligand 规格： 48T/96T 英文缩写： sCD40L Dihydrosenkyunolide C 195142-72-4 中文名：二氢洋川芎内酯C 分子式：C12H14O3
可溶性髓系细胞触发受体-1 英文名称： soluble iggering receptor expressed on myeloid cells-1 规格： 48T/96T 英文缩写： sEM-1 Pazufloxacin mesilate 中文名：甲磺酸帕珠 分子式：C17H19FN2O7S
可溶性白细胞抗原G 英文名称： soluble leukocyte aigen G 规格： 48T/96T 英文缩写： sHLA-G Norethindrone 中文名：炔诺酮 分子式：C20H26O2
可溶性白细胞抗原 G5(sHLA-G5) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装 Norfloxacin 70458-96-7 中文名： 分子式：C16H18FN3O3 度：98.0% 关键词：
可溶性白细胞抗原 G(sHLA-G) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装 Norfloxacin 中文名： 分子式：C16H18FN3O3
S-2-羟基戊二酸 (2S)-2-Hydroxyglutaric Acid 质量规格：美国,95% 人酪羟化酶(TH)ELISA检测试剂盒Humayrosinehydroxylase,THELISAKit 96T/48T
3-去氮腺嘌呤 3-Deazaneplanocin A HCl salt 质量规格：美国，97% 大鼠细胞膜钙转运ATP酶1(ATP2B1)试剂盒 Rat Plasma membrane calcium-anspoing ATPase 1,ATP2B1 ELISA kit
4-氧代维甲酰酚胺 3-Keto Fenretinide 质量规格：美国 英文名称RatCardiolipinIgG(ACAIgG)ELISAKit大鼠心0脂抗体CardiolipinIgG(ACAIgG)规格：96T/48T
4-表米诺环素 4-Epi Minocycline 质量规格：美国 果蝇直接法PCR扩增试剂盒50
牛磺脱氧胆酸钠 Taurodeoxycholic acid salt 质量规格：>97%,BR ELISAKitGP-Ⅳ人血小板膜糖蛋白Ⅳ规格：48T/96T
四环素(国产) Tetracycline 质量规格：BR,国产 小鼠肌球蛋白重链4(MYH4)ELISA试剂盒 ，英文名： MYH4 ELISA Kit
乙基氢化铜蛋白,盐酸奥普托欣 Ethylhydrocupreine HCl,Optochin HCl 质量规格：>97%,美国进口 人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA检测试剂盒Humanglucoseoxidase,GODELISAKit 96T/48T
莫西菌素,莫西克汀 Moxidectin 质量规格：>90%,BR 大鼠细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)试剂盒 Rat cytokeratin 18-M65,CK 18-M65 ELISA kit
莫西菌素,莫西克汀(标准品) Moxidectin 质量规格：含量测定,标准品 英文名称RatCardiolipinIgA(ACAIgA))Elisakit大鼠心0脂抗体CardiolipinIgA(ACAIgA)规格：96T/48T
氨力农 Amrinone 质量规格：>98%,BR 过氧化氢处理DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20
全血Taq DNA聚合酶体液单胺氧化酶B型（MAO－B）活性化学发光法定量检测试剂盒
组织单胺氧化酶B型（MAO－B）活性化学发光法定量检测试剂盒
细胞单胺氧化酶B型（MAO－B）活性化学发光法定量检测试剂盒
体液单胺氧化酶A型（MAO－A）活性化学发光法定量检测试剂盒
组织单胺氧化酶A型（MAO－A）活性化学发光法定量检测试剂盒
