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产品详细介绍:
本试剂盒是由热启动酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系,本产品使用简便,无需事先提纯可直接用血液为模板扩增目的基因,可有效扩增高GC含量的模板和引物。 保存:-20℃,避免反复冻融。 |
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
Blood Direct PCR Kit | 50μl×40次|50μl×200次 | GOY-F10314 |
DNA提取流程图:
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
甲型流感H3N2HA1 英文名称: Influenza A H3N2 HA1 规格: 48T/96T 英文缩写: H3N2 HA1 Przewaquinone A 中文名:紫丹参甲素 分子式:C19H18O4
甲型流感H1N1 英文名称: Influenza A H1N1(Swine Flu 2009) HA 规格: 48T/96T 英文缩写: H1N1 HA Prosapogenin A 19057-67-1 中文名:薯蓣次皂苷A 分子式:C39H62O12
甲型肝炎病毒抗体IgG 英文名称: Human Hepatitis A Virus IgG 规格: 48T/96T 英文缩写: HAV IgG n-Tritriacontan-16,18-dione 24514-86-1 中文名: 分子式:C33H64O2 度:% 关键词: 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
甲型副伤(SPA)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T Topiramate 97240-79-4 中文名:托吡酯 分子式:C12H21NO8S
家蚕卵黄蛋白elisa试剂盒 家蚕卵黄蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 家蚕卵黄蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:家蚕卵黄蛋白试剂盒、家蚕卵黄蛋白elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid 中文名: 分子式:C13H16O5
AV-951 Tivozanib, AV951 质量规格:>98%,VEGFR抑制剂 人胰脂肪酶(PL)ELISA检测试剂盒HumanPancreaticLipase,PLELISAKit 96T/48T
7,8-二氢生物蝶呤 7,8-Dihydro-L-biopterin 质量规格:HPLC>95%,BR 大鼠细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)试剂盒 Rat Cytotoxic T Lymphocyte Associated Aigen 4,CTLA-4 ELISA Kit
整形素 Chlorflurenol-methyl 质量规格:>90%,BR 英文名称RatoponinIELISAKit大鼠心肌肌钙蛋白I(cTnI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
帕拉米韦三水合物 Peramivir Trihydrate 质量规格:>98%,BR 海洋动物(虾贝类)线粒体粗提分离试剂盒10/50
神经保护剂NXY059 NXY-059,Cerovive 质量规格:>95%,BR ELISAKitFPA人血纤肽/纤维蛋白肽A规格:48T/96T
L-犬尿(标准品) L-Kynurenine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠肌肌酸激酶(CKM)ELISA试剂盒 ,英文名: CKM ELISA Kit
磺胺二甲氧嗪; 磺胺二甲氧基 Sulfadimethoxine 质量规格:>99%,AR 人胰(PAMY)ELISA检测试剂盒HumanPancreaticAmylase,PAMYELISAKit 96T/48T
磺胺二甲氧基(标准品) Sulfadimethoxine 质量规格:HPLC>98%,标准品 大鼠细胞凋亡调节因子BAX(BAX)试剂盒 Rat Apoptosis regulator BAX,BAX ELISA kit
奥斯他伟酸;羧酸 Oseltamivir acid 质量规格:>97,BR 英文名称RatcardiacoponinIELISAKit大鼠心肌肌钙蛋白I(cTNI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
alpha-熊果苷(标准品) alpha-Arbutin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 海洋动物种系18sRNA基因扩增分析试剂盒20
血液直接PCR扩增试剂盒体液氧化酶活性比色法定量检测试剂盒
组织氧化酶活性比色法定量检测试剂盒
细胞氧化酶活性比色法定量检测试剂盒
体液结构型内皮细胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性荧光定量检测试剂盒
血液结构型内皮细胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性荧光定量检测试剂盒
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。