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产品详细介绍:
二氢乙啶是过氧化物的指标,在细胞质中呈蓝色荧光,被氧化后,可进入细胞的DNA 中,使细胞核呈现明亮的红色荧光。 |
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
5mg | GOY-F10219 |
DNA提取流程图:
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
山羊脑啡肽(ENK)ELISA试剂盒 3H-1,2-Benzodithiol-3-one-1,1-dioxide 66304-01-6 中文名:3H-1,2-苯并二硫-3-酮-1,1-二氧化物 分子式:C7H4O3S2 度:90.0% 关键词:
山羊球蛋白G 英文名称: Immunoglobulin G 规格: 48T/96T 英文缩写: IgG 3-Ethyl-4-methyl-3-pyrrolin-2-one 766-36-9 中文名: 分子式:C7H11NO 度:98.0% 关键词:
山羊球蛋白A 英文名称: Immunoglobulin A 规格: 48T/96T 英文缩写: IgA 3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol 26614-48-2 中文名:3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β 分子式:C21H32O2 度:93.0%
山羊检测(e)ELISA试剂盒 3-Benzyl-5-(2-hydroxyethyl)-4-methylthiazolium chloride 中文名:3-苄基-5-(2-)-4-甲基氯化噻唑鎓 分子式:C13H16ClNOS
山羊坏死因子αelisa试剂盒 山羊坏死因子α试剂盒 规格型号:96T/48T 山羊坏死因子α试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:山羊坏死因子α试剂盒、山羊坏死因子α elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid 99469-99-5 中文名: 分子式:C13H16O5 度:98.0% 关键词:
醋酸氟氢(标准品) Fludrocortisone acetate 质量规格:含量97%-103%,标准品 鸡核糖核酸(Irna)ELISA检测试剂盒ChickenImmuneRNA,IrnaELISAKit 96T/48T
醋酸氟氢 Fludrocortisone acetate 质量规格:>97% 人Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)试剂盒 Human procollagen Ⅲ propeptide,PⅢP ELISA Kit
阿折地平 Azelnidipine 质量规格:>99%,BR 英文名称MouseTie-2ELISAkit小鼠Tie-2规格:96T/48T
噻奈普汀酸;噻奈普汀 Tianeptine 质量规格:>98%,BR 冰冻切片组织EGFR蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
噻奈普汀酸;噻奈普汀(标准品) Tianeptine 质量规格:HPLC>99%,标准品 Ratconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISA试剂盒大鼠结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
噻奈普汀钠盐 Tianeptine salt 质量规格:>98%,BR 小鼠巨嗜细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2)ELISA试剂盒 ,英文名: MCP-1/CCL2 ELISA Kit
D- D-Glutamine 质量规格:0.98 鸡巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA检测试剂盒ChickenAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AmAC-1ELISAKit 96T/48T
扎托布洛芬 Zaltoprofen 质量规格:>98% 人Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)试剂盒 Human N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit
甘胆酸钠 ;甘氨胆酸钠 Glycocholate Hydrate 质量规格:>98% 英文名称MouseTie-1ELISAkit小鼠Tie-1规格:96T/48T
甘露;D-甘露糖 Mannitol;D-Mannitol 质量规格:>99%,BR 冰冻切片组织ERBETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
活性氧ROS检测荧光探针-DHE,红300/610无脊椎动物和昆虫细胞基质金属(MMP)总活性比色法定量检测试剂盒
无脊椎动物和昆虫体液基质金属(MMP)总活性荧光定量检测试剂盒
无脊椎动物和昆虫组织基质金属(MMP)总活性荧光定量检测试剂盒
无脊椎动物和昆虫细胞基质金属(MMP)总活性荧光定量检测试剂盒
细胞基质金属9(MMP9)原位明胶酶谱法(in situ ?zymography)荧光染色试剂盒
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。