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中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
DAF-FM DA Solution (5mM in DMSO) | 100T | GOY-F10233 |
产品详细介绍:
本品为溶解于DMSO的淡黄色溶液,浓度为5mM。本品适用于检测细胞内的一氧化氮水平,推荐工作浓度为1-10μM。如果收集细胞后再装载探针,通常至少可以检测100个样品。 DAF-FM DA即4-Amino-5-Methylamino-2,7-Difluorofluorescein Diacetate,也称DAF-FM Diacetate,是新一代用于一氧化氮(nitric oxide, NO)定量检测的探针,其检测原理为:DAF-FM DA可以穿过活细胞膜(cell-permeable),进入细胞后可以被胞浆内的酯酶催化形成不能穿过细胞膜的DAF-FM。DAF-FM本身仅有很弱的荧光,光量子约0.005,但在与NO反应后生成荧光素-苯骈三氮唑(benzotriazole),发强烈绿色荧光,光量子约0.81。Ex~495nm,Em~515nm。任何可以检测荧光素(fluorescein)的仪器,包括荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计或荧光酶标仪都可以用于该荧光探针的检测。 DAF-FM DA是新一代NO检测探针,与以往成功且应用广泛的一氧化氮荧光检测探针DAF-2 Diacetate相比较,具有多方面的改进:1)DAF-FM DA和NO加合反应形成的荧光产物在pH5.5以上不受pH影响;2)DAF-FM DA和NO加合反应形成的产物荧光更加稳定,不容易淬灭,这样更加便于检测;3)DAF-FM DA对一氧化氮的检测灵敏度更高,其低检测浓度可达到3nM,而DAF-2 Diacetate的低检测浓度约为5nM。 CAS:254109-22-3 分子式:C25H18F2N2O7 分子量:496.42 纯度:>98% 储存条件:-20℃避光,有效期12个月 |
DNA提取流程图:
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
人组织蛋白去乙酰化酶elisa试剂盒 人组织蛋白去乙酰化酶试剂盒 规格型号:96T/48T 人组织蛋白去乙酰化酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人组织蛋白去乙酰化酶试剂盒、人组织蛋白去乙酰化酶elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 24352-51-0 中文名: 分子式:C28H42 度:% 关键词: 麦角甾烷; 对照品; 标准品; 微生物代谢产物; 天然产物; 天然产物库
人组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒 3,5-Di-O-caffeoylquinic acid 2450-53-5 中文名:异绿原酸A 分子式:C25H24O12
人组织蛋白酶抗体elisa试剂盒 人组织蛋白酶抗体试剂盒 规格型号:96T/48T 人组织蛋白酶抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人组织蛋白酶抗体试剂盒、人组织蛋白酶抗体elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 24352-51-0 中文名: 分子式:C28H42
人组织蛋白酶抗体(CathAb)ELISA试剂盒 3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 中文名: 分子式:C28H42 度:%
人组织蛋白酶S(cath-S)ELISA试剂盒 3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene 中文名: 分子式:C28H42
普拉洛芬 Pranoprofen 质量规格:>97%,BR 英文名称RatinhibinBELISAKit大鼠抑制素B(INHB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
普拉洛芬(标准品) Pranoprofen 质量规格:HPLC>97%,标准品 谷待测样品处理试剂盒20
牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白组分五 Albumin(bovine fraction V);BSA 质量规格:Purity>98%,分子生物学级 ELISAKitHPA人乙酰肝素酶规格:48T/96T
萘啶酮酸;萘啶酸 Nalidixic acid 质量规格:>98% 小鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA试剂盒 ,英文名: Cav-1 ELISA Kit
糖原,α-1,6 葡聚糖,糖元 Glycogen from oyster 质量规格:BR,>99%,河蚌提取,Type II 大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA检测试剂盒RatAlpha-fetoprotein,AFPELISAKit 96T/48T
化乙锭(EB) Ethidium bromide(EB) 质量规格:>95% 人促卵泡素(FSH)试剂盒 human follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
贝西盐酸盐 Besifloxacin HCl 质量规格:>99%,BR RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒规格:96T/48T
甜菜碱(标准品) Betaine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 HRP稳定/稀释溶液10毫升
甜菜碱 Betaine 质量规格:>99%,无水高 Mouseα-HydroxybyrateDehydrogenase,αHBDHELISA试剂盒小鼠α羟基脱氢酶(αHBDH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
尿酸 Uric acid 质量规格:0.99 小鼠窖蛋白(CAV1)ELISA试剂盒 ,英文名: CAV1 ELISA Kit
一氧化氮检测探针细胞白细胞介素-1β转换酶(ICE)活性荧光淬灭法定量检测试剂盒
组织样品组织G(CATHEPSIN G)活性比色法定量检测试剂盒
细胞组织G(CATHEPSIN G)活性比色法定量检测试剂盒
组织样品组织E(CATHEPSIN E)活性比色法定量检测试剂盒
细胞组织E(CATHEPSIN E)活性比色法定量检测试剂盒