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中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
Alexa Fluor 488 NHS Ester (Succinimidyl Ester) | 1mg | GOY-F10229 |
产品详细介绍:
本品是一种亮绿色荧光染料,具有水溶性和较强的pH稳定性(pH4-10),可被488nm激发产生信号稳定的荧光,常作为一种细胞标记物偶联到抗体、多肽、蛋白、示踪剂和其他底物上广泛用于细胞成像和检测。 Alexa Fluor 488 NHS Ester,即含N-羟基琥珀酰亚胺(N-Hydroxysuccinimide)活化基团的Alexa Fluor 488,可直接与生化分子上的氨基(-NH2)反应形成稳定的酰胺键,主要是伯胺,可用于标记任何含伯胺的蛋白、多肽、氨基修饰的寡核苷酸或者其他含氨基的生物分子。 荧光团(Fluorophore Label):Alexa Fluor 488 dye 活性基团(Reactive Group):NHS ester 反应性(Reactivity):伯胺(R-NH2) 分子式:C25H15Li2N3O13S2 分子量:643.4 外观:粉末 Ex/Em:494/517 nm 摩尔吸光系数:71,000 cm-1M-1 校正因子(CF280):0.11 储存条件:-20℃,有效期3个月 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
乳酸(lacticacid)测定试剂盒(测血清、组织等)(比色法) Rhein 478-43-3 中文名:大黄酸 分子式:C15H8O6 度:98.0% 关键词:
肉毒杆菌(E/F型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T Withaphysalin A 57423-72-0 中文名: 分子式:C28H34O6
肉毒杆菌(A/B型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T Withaphysalin A 57423-72-0 中文名: 分子式:C28H34O6 度:98.0% 关键词:
溶酶体相关膜蛋白3 英文名称: Human Lysosomal Associated membrane protein 3 规格: 48T/96T 英文缩写: LAMP3 3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene 36157-40-1 中文名: 分子式:C6H4Cl2OS 度:98.0% 关键词:
标准品 Standard for lysozyme Ranitidine 66357-59-3 中文名:盐酸 分子式:C13H23ClN4O3S
双甘氨二肽 Gly-Gly 质量规格:>99%,BR Mouseα1-microglobulin,α1-MGELISA试剂盒小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
重组人胰岛素 Human recombinant Insulin 质量规格:效价测定 小鼠睫状神经营养因子(CF)ELISA试剂盒 ,英文名: CF ELISA Kit
人胰岛素 Human Insulin 质量规格:测定用 大鼠卵巢癌标志物CA125ELISA检测试剂盒Ratovariancancermarker-CA125ELISAKit 96T/48T
硝酸舍他康唑 Sertaconazole nitrate 质量规格:>98%,BR 人促睡眠肽(DSIP)试剂盒 Human delta sleep-inducing peptide,DSIP ELISA Kit
醋酸依降钙素 Elcatonin Acetate 质量规格:BR RatskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISAKit大鼠横纹肌辅肌动蛋白α(smActinin-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
醋酸恩夫韦地 Enfuvirtide Acetate 质量规格:BR,>98% HRP标记一抗50微克
D-海藻糖无水 D-(+)-Trehalose Anhydrous 质量规格:≥99%,BR Mouseα2-Aiplasmin,α2-APELISA试剂盒小鼠α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二醋酸戈那瑞林(LH-RH) Gonadorelin Acetate 质量规格:>98%,二醋酸盐 小鼠睫状神经营养因子(CF)ELISA 试剂盒
醋酸戈舍瑞林 Goserelin Acetate 质量规格:BR,>98% Rat platelet aibodies IgG/M/A (PA-IgG/M/A) ELISA Kit 大鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒
醋酸亮丙瑞林 Leuprolide Acetate 质量规格:BR,>98% Humandeltasleep-inducingpeptide,DSIPELISAKit 人促睡眠肽(DSIP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Alexa Fluor 488-N-羟基琥珀酰亚胺酯血液血管紧张素Ⅰ转化酶1(ACE1)活性荧光共振能量转移法(FRET)定量检测试剂盒
组织血管紧张素Ⅰ转化酶1(ACE1)活性荧光共振能量转移法(FRET)定量检测试剂盒
细胞血管紧张素Ⅰ转化酶1(ACE1)活性荧光共振能量转移法(FRET)定量检测试剂盒
体液血管紧张素Ⅰ转化酶1(ACE1)活性荧光定量检测试剂盒
血液血管紧张素Ⅰ转化酶1(ACE1)活性荧光定量检测试剂盒
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)