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产品详细介绍:
本系列探针是主要对活细胞中的酸性区室(如溶酶体、顶体)动态合成和功能进行研究的一类荧光探针,该类探针的染色具有向酸性,可通过质子化作用在酸性细胞器内累积。该类探针的这种质子化作用还可解除染料的荧光淬灭性,使其所发射的荧光强度更强。因此,本系列探针随着细胞器的酸化程度其荧光强度呈pH依赖型(向酸)增强。本品Green DND-189具有较低的pKa值,仅在酸性区室内才具有荧光。本品以溶于无水DMSO的1mM储存液形式提供。如对活细胞中的酸性区室进行选择性标记和染色,可选择SY0569、SY0570探针。 分子式:C24H22N4O2 分子量:398.46 Ex/Em:443/505 pKa:~5.2 颜色:绿色 储存条件:-20℃干燥,有效期6个月 |
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
Lysosome Green DND-189 | 50μl | GOY-F10235 |
DNA提取流程图:
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
人组酸丰富糖蛋白(HRG)酶联吸附测定试剂盒 Human HRG (Histidine Rich Glycoprotein) ELISA Kit 3,4-O-Isopropylidene shikimic acid 183075-03-8 中文名: 分子式:C10H14O5 度:98.0% 关键词: 莽草酸; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
人组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒 3,4-O-Isopropylidene shikimic acid 中文名: 分子式:C10H14O5 度:98.0%
人组胺elisa试剂盒 人组胺试剂盒 规格型号:96T/48T 人组胺试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人组胺试剂盒、人组胺elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one 1220891-22-4 中文名: 分子式:C10H10O3 度:97.0% 关键词: 四氢萘酮; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
人组胺(HIS)ELISA试剂盒 3,4-O-Isopropylidene shikimic acid 中文名: 分子式:C10H14O5
人组胺(HIS)ELISAKit 3,4-Didehydrosapriparaquione 142763-37-9 中文名: 分子式:C20H24O3 度:95.0% 关键词:
N-苄氧羰基-L- Z-Gln-OH 质量规格:>98%,BR ELISAKitAChRab人乙酰受体抗体规格:48T/96T
N-CBZ-L-丙 CBZ-L-Gly 质量规格:>98%,BR 小鼠角化细胞生长因子(KGF/FGF-7)ELISA试剂盒 ,英文名: KGF/FGF-7 ELISA Kit
盐酸丙美卡因 Proparacaine HCl 质量规格:>98%,BR 大鼠髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISA检测试剂盒Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 96T/48T
N-苄氧羰基-L-丝 Z-Ser-OH 质量规格:>98.5%,BR 人促甲状受体(TSHR)抗体试剂盒 Human TSHR aibody ELISA Kit
N-苄氧羰基-L-苏 Z-Thr-OH 质量规格:0.98 RatsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)酶联分析大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)酶联分析体(sEPCR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
N-CBZ-beta-丙 Z-β-Ala-OH 质量规格:0.98 HSV(HERPESSIMPLX)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2
CBZ-D-谷α-苄酯 Z-Glu-OBzl 质量规格:>98% Mouseα-L-iduronidase,IDUAELISA试剂盒小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
N-苄氧羰基-L-酪 Z-Tyr-OH 质量规格:0.98 小鼠角化细胞因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒 ,英文名: AR ELISA Kit
Z-L-酪甲酯 Z-Tyr-OMe 质量规格:>98%,BR 大鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA检测试剂盒RatCyclin-D1ELISAKit 96T/48T
钠 Amoxicillin 质量规格:>90%,BR 人促甲状受体(TSHR)试剂盒 Human TSHR ELISA Kit
溶酶体绿色荧光探针细胞组织D(CATHEPSIN D)活性比色法定量检测试剂盒
体液样品组织B(CATHEPSIN B)活性比色法定量检测试剂盒
血液样品组织B(CATHEPSIN B)活性比色法定量检测试剂盒
组织样品组织B(CATHEPSIN B)活性比色法定量检测试剂盒
细胞组织B(CATHEPSIN B)活性比色法定量检测试剂盒
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。