细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)
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细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)

细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2022-04-21 12:32:49
554
属性:
供货周期:现货;规格:20T;货号:GOY-01X9660;应用领域:化工;主要用途:公司产品仅供科研;
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产品属性
供货周期
现货
规格
20T
货号
GOY-01X9660
应用领域
化工
主要用途
公司产品仅供科研
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上海谷研实业有限公司

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产品简介

细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)公司正在出售的产品:FAK2/Pyk2 富含脯氨的酪氨激2抗体 AR,98%
phospho-Pyk2 (Tyr402) 化富含脯氨的酪氨激2抗体邻酚酞络合剂 indicator
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phospho-FANCD2(Ser222

详细介绍

以下是细胞生物学试剂的详细介绍:

中文名称

英文名称

产品规格

发货周期

细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)


20T

1~3天

 

公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍:

保存条件:-20℃冰冻保存一年。

工作原理:

在机体内部随时都在发生着细胞的死亡。传统上用显微镜来观察细胞的死亡,其特征为核染色质的浓缩及碎片的形成。但是这种现象出现的很晚,时间也很短暂。凋亡的特征是内源性核酸内切酶被激活,细胞自身的染色质或DNA 被切割,出现单链或双链缺口,并产生与 DNA 断点数目相同的3’-OH 末端。末端脱氧核糖核酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以将标记的dUTP(DIG-dUTP)标记至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 结合在 DNA 断点部位,可以通过生物标记的抗抗体(Anti-DIG-Biotin)反应后,再结合链酶亲和素-荧光素 FITC(SABC-FITC)。FITC 在 490-495nm 激化,在 520-530nm 发射荧光,呈黄绿色。凋亡的细包核呈黄绿色,从而可以在显微镜下观察到着色的凋亡细胞。

试剂盒内容:

1.标记缓冲液(Labeling Buffer)1ml

2.末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT,×20)20μl

3.DIG-dUTP(×20)20μl

4.封闭液(Blocking Reagent)4ml

5.生物素化抗抗体(× 100)20μl

6.SABC-FITC(× 100)20μl

7.Proteinase K(×200)50μl

8.抗体稀释液 4ml

操作步骤:

1. 样品染色

1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。

2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。

对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。

3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。

4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。

2. 样品检测

1) 流式细胞仪检测:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。

建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。

2) 荧光显微镜检测:

染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。

成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)英文名称:FGFR1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白157抗体包装5g

成纤维细胞生长因子7(FGF7)英文名称:FGF7 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白90B抗体包装10MG

成纤维细胞生长因子3(FGF3)英文名称:FGF3 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白144A抗体包装25g

成纤维细胞生长因子23(FGF23)英文名称:FGF23 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白104抗体包装5g

成纤维细胞生长因子18(FGF18)英文名称:FGF18 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白12抗体包装1g

成纤维细胞生长因子15(FGF15)英文名称:FGF15 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白67抗体包装25g

成纤维细胞生长因子13(FGF13)英文名称:FGF13 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白129抗体包装5g

成纤维细胞生长因子12(FGF12)英文名称:FGF12 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白107抗体包装1g

成纤维细胞生长因子11(FGF11)英文名称:FGF11 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白18抗体包装5g

成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)英文名称:FAPα ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白56抗体包装1g

沉默调节蛋白6(SIRT6)英文名称:SIRT6 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白116抗体包装5g

沉默调节蛋白1(SIRT1)英文名称:SIRT1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白117抗体包装1g

超氧化物歧化1(SOD1)英文名称:SOD1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白127抗体包装100g

肠型脂肪结合蛋白(FABP2)英文名称:FABP2 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白138抗体包装25g

叉头框蛋白P3(FOXP3)英文名称:FOXP3 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白144NL抗体包装5g

立枯丝核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 质量规格:>99%,BR游离状腺试剂盒2-O-乙酰山椒子烯;

庞蒂亚克亚硫盐杆菌Sulfitobacter│pontiacus 质量规格:HPLC>98%,标准品游离睾试剂盒柚皮-7-O-葡萄糖苷;Narin

米曲霉Aspergillus│oryzae 质量规格:>98%,BR游离蛋白S试剂盒异飞蓟宾;Isosilybin
细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)白色姜成林氏 2,3-二氯CD19分子Elisa

矮棒曲霉 N'-叔丁氧羰基-L-鸟氨酸结核Elisa

大肠埃希氏杆 曲洛斯坦GTP环化水解1Elisa

条纹鸡枞 异酸酯烯酸乙酯肝钠Elisa

拟青霉 非那吡啶盐酸盐五聚Elisa

泛属 2,3-二氟苯丁卵磷脂胆固酰基转移Elisa

掷抱酵母 硫代酰乙酯霍乱Elisa

黑木耳(植5) 6-甲基-2-吡啶甲酸甲酯线粒体解偶联蛋白2Elisa

酿酒酵母 溴化六氨合钴 (metals basis)抗连接IgG抗体Elisa

酿酒酵母 3-基-4-三氟甲基吡啶抗Abeta IgG抗体Elisa

白色短波单胞 3-基-2,6-二氯-4-(三氟甲基)吡啶微管相关蛋白1A;1B轻链3BElisa

挪威毕赤酵母 β-托品组蛋白脱乙酰基6Elisa

华根霉 3-氨基-2-溴-6-甲氧基吡啶腺苷Elisa

黄曲霉 邻溴苯酸乙酯FAM19A4Elisa

香菇 吡唑解草酯抗风疹病IgG抗体Elisa

 


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