产品属性：

中文名称：细胞凋亡检测试剂盒IV(CY3)

英文名称：

产品规格：20T/100T

发货周期：1～3天
公司产品仅用于科研

商品介绍：

细胞生物学研究有以下几个方面：

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：

①细胞核、染色体以及基因表达的研究；

②生物膜与细胞器的研究；

③细胞骨架体系的研究；

④细胞增殖及其调控；

⑤细胞分化及其调控；

⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；

⑦细胞的起源与进化；

⑧细胞工程.

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

叉头框蛋白O3(FOXO3)英文名称：FOXO3 ELISA Kit转录同源蛋白质CUX2抗体包装1g

叉头框蛋白M1(FOXM1)英文名称：FOXM1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白146抗体包装5g

叉头框蛋白A2(FOXA2)英文名称：FOXA2 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白147抗体包装1g

层粘连蛋白β1(LAMβ1)英文名称：LAMβ1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白158抗体包装250mg

层粘连蛋白α1(LAMα1)英文名称：LAMα1 ELISA Kit钙粘附蛋白-11抗体包装100g

补体因子D(CFD)英文名称：CFD ELISA Kit核仁蛋白C23抗体包装25g

补体因子B(CFB)英文名称：CFB ELISA Kit皮肤相互作用蛋白2抗体包装5g

补体成分5a受体1(C5aR1)英文名称：C5aR1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框149抗体包装25g

补体成分5a(C5a)英文名称：C5a ELISA Kit碳化合物激结构域蛋白质抗体包装5g

补体成分5(C5)英文名称：C5 ELISA Kit尾侧型同源转录因子1抗体包装1g

补体成分4b(C4b)英文名称：C4b ELISA Kit补体C1qTNF8链多肽抗体包装5g

补体成分4a(C4a)英文名称：C4a ELISA Kit21号染色体开放阅读框62抗体包装1g

补体成分4(C4)英文名称：C4 ELISA Kit磷化胞浆型磷脂A2抗体包装5g

补体成分3(C3)英文名称：C3 ELISA Kit9号染色体开放阅读框46抗体包装1g

补体3a(C3a)英文名称：C3a ELISA Kit20号染色体开放阅读框103抗体包装25g

鲨鱼弧菌Vibrio│carchariae 质量规格：HPLC>98%,标准品游离雌三试剂盒异鼠李-3-O-半乳糖苷;Isorha

假交替单胞菌Pseudoalteromonas│sp. 质量规格：>97%,BR游离β绒毛膜促性腺激试剂盒茵芋碱;Skimmianine

沙门氏菌Salmonella│sp. 质量规格：含量测定幽门螺旋菌抗体试剂盒一枝蒿庚;Bullatine G；so
细胞凋亡检测试剂盒IV(CY3)酿酒酵母 利福霉SApat-1Elisa

松针散斑壳 3,4-二溴吡啶克氏锥虫Elisa

枯草芽孢杆 (R)-2-甲基吡咯烷盐酸盐溶Elisa

深红酵母 4-甲基-5-甲氧基-1,2,4-三唑啉-3-酮凋亡激活因子Elisa

微白类诺卡氏 (1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲支链氨基酸Elisa

凯斯特鞘氨单胞 4-氟间苯二肝糖原Elisa

尖角凸脐蠕孢 盐酸沙格雷酯PPP1CaElisa

蔷薇生链格孢 2-甲基硫代酰幽门螺杆IgG抗体Elisa

假单胞属 4-苄基-2-吗琳羧酸盐酸盐蛋白精氨酸甲基转移1Elisa

Microterricola viridarii (S)-N-Boc-2-羟甲基吗啉分泌型卷曲相关蛋白1Elisa

苏云金芽孢杆 (R)-N-Boc-2-羟甲基吗啉Dickkopf 3Elisa

胶孢 4-Boc-2-羟甲基吗啉CTXIIIElisa

孢吸水链霉昆明变种 3-氯-4-苯5α-双氢睾酮 Elisa

pYES3/CT 3-氯-6-哒性别决定区Y蛋白Elisa

青霉（加词待译） 4-羟基环己酮肾综合征出血热病抗体Elisa 

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。

8、结果分析

a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)