商品介绍：

以下是细胞生物学试剂的详细介绍：

操作步骤：

1. 样品染色

1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。

2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。

对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。

3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。

4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。

2. 样品检测

1) 流式细胞仪检测：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。

建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。

2) 荧光显微镜检测：

染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

毒蕈碱型胆碱受体M3(CHRM3)英文名称：CHRM3 ELISA Kit毛细管形态发生蛋白1抗体包装100g

毒蕈碱型胆碱受体M2(CHRM2)英文名称：CHRM2 ELISA Kit肌钙集蛋白/收钙抗体包装25g

凋亡蛋白激活因子1(APAF1)英文名称：APAF1 ELISA Kit钙结合蛋白样39抗体包装5g

淀粉样前体蛋白(APP)英文名称：APP ELISA Kit癌胚抗原相关粘附分子3抗体包装1ml

淀粉样蛋白β前体样蛋白1(APLP1)英文名称：APLP1 ELISA Kit20号染色体开放阅读框31抗体包装1g

淀粉样蛋白β1-42(Aβ1-42)英文名称：Aβ1-42 ELISA Kit成簇相关蛋白1抗体包装25g

淀粉样蛋白β1-40(Aβ1-40)英文名称：Aβ1-40 ELISA Kit肿瘤/抗原2抗体包装5g

碘腺原脱碘Ⅲ(DIO3)英文名称：DIO3 ELISA Kit肿瘤/抗原1B包装1g

碘腺原脱碘Ⅱ(DIO2)英文名称：DIO2 ELISA Kit皮肤T淋巴瘤相关抗原5抗体（脑膜瘤表达抗原6）包装5g

抵抗(RETN)英文名称：RETN ELISA Kit肿瘤/抗原3抗体包装10mg

低氧诱导因子2α(HIF2α)英文名称：HIF2α ELISA Kit脑多巴神经营养因子抗体包装1g

低氧诱导因子1α(HIF1α)英文名称：HIF1α ELISA Kit钙依赖分泌激活蛋白2/自闭症的相关蛋白抗体包装5g

低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)英文名称：LRP1 ELISA Kit胆囊收缩A受体抗体包装100mg

低密度脂蛋白受体衔接蛋白1(LDLRAP1)英文名称：LDLRAP1 ELISA Kit小脑肽3抗体包装1g

低密度脂蛋白受体(LDLR)英文名称：LDLR ELISA Kit周期依赖性激样5抗体包装1g

根瘤菌Rhizobium│sp. 质量规格：>98%,BR,醋盐形式远端上游元件结合蛋白1试剂盒盐伊立替康;Irinotecan hy

: ivcas7.00510资源名称: 苏云金芽孢杆菌 质量规格：>920U/MG,USP原纤维蛋白-1试剂盒氧化前胡;Oxypeucedanin

Z20259资源名称: 嗜热链球菌 质量规格：>97%原钙黏1试剂盒羊藿次苷I;Icarisid I
5-溴脱氧尿嘧啶核苷Paraconiothyrium sp. 4-乙酸乙酯植酸Elisa

火木层孔 六钴酸锌植酸Elisa

异常汉逊酵母 盐酸奥洛他定癸酸甘油酯-1Elisa

锗栓孔 (淡黄褐栓) 1-(N-Boc-氨乙基)哌40S核糖体蛋白S3Elisa

德氏乳杆保加利亚亚种 4-脲脊髓灰质炎病IgG抗体Elisa

脱硫弧脱硫亚种（脱硫微螺、脱硫螺、脱硫杆、脱硫芽孢弧、脱硫弧） 乙二四乙酸铜钠二水合物脊髓灰质炎病IgM抗体Elisa

松针散斑壳 苯基胍碳酸盐可溶性CD28分子Elisa

生假丝酵母 5-甲基-2-呋喃基质金属蛋白14Elisa

肿痂链霉 2,2-二甲基-3-羟基酸甲酯状瘤病16抗体Elisa

光柄滑锈伞 2-甲氧基-4-甲基嘧啶状瘤病18抗体Elisa

辽宁类芽孢杆 4-巴豆酸抗Sa抗体Elisa

蚁巢伞属 羟酸铵盐球蛋白G Fc段受体ⅠElisa

大肠埃希 球蛋白G Fc段受体ⅡElisa

运动节杆 三乙酰酮铝性休克综合征1Elisa

酿酒酵母 3,5-二溴吡啶-4-甲酸色P4502D6Elisa