其他品牌 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
DAPI Solution | 5mg/ml×0.2ml | 1~3天 |
商品介绍:
本品DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。 DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。 DAPI的大激发波长为340nm,大发射波长为488nm;DAPI和双链DNA结合后,大激发波长为364nm,大发射波长为454nm。 本DAPI溶液用水配制,浓度为5mg/ml。用于细胞核染色时,推荐的DAPI工作浓度为0.5-10μg/ml。 CAS:28718-90-3 分子式:C16H15N5·2HCl 分子量:350.25 储存条件:-20℃避光,有效期一年。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
脑啡肽原B(PDYN)英文名称:PDYN ELISA Kit乙脱氢2型抗体包装5g
脑啡肽原A(PENK)英文名称:PENK ELISA Kitγ-基丁脱氢抗体包装1g
脑肠肽(Gehrelin)英文名称:Gehrelin ELISA Kit衰老相关蛋白5抗体包装25g
脑肠肽(BGP/Gehrelin)英文名称:BGP/Gehrelin ELISA Kit磷化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体包装5g
末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)英文名称:TCC C5b-9 ELISA Kit釉基质蛋白抗体包装1g
膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)英文名称:ANX-Ⅴ ELISA Kit磷化腺苷单磷活化蛋白激α2抗体包装25g
缪勒管抑制物质/抗缪勒管激(AMH)英文名称:AMH ELISA Kit磷化腺苷单磷活化蛋白激α2抗体包装5g
苗条受体(LR/Ob-R)英文名称:LR/Ob-R ELISA Kit磷化雄激受体抗体包装1g
免疫球蛋白M(IgM)英文名称:IgM ELISA Kit磷化雄激受体抗体包装5g
免疫球蛋白G4(IgG4)英文名称:IgG4 ELISA Kit磷化雄激受体抗体包装1g
免疫球蛋白G2(IgG2)英文名称:IgG2 ELISA Kit磷化雄激受体抗体包装5g
免疫球蛋白G1(IgG1)英文名称:IgG1 ELISA Kit锚定蛋白重复结构域蛋白激ANKK1抗体包装1g
免疫球蛋白G(IgG)英文名称:IgG ELISA Kit磷化内收蛋白抗体包装25g
免疫球蛋白E(IgE)英文名称:IgE ELISA Kit膜粘连蛋白11抗体包装5g
免疫球蛋白D(IgD)英文名称:IgD ELISA Kit膜粘连蛋白13抗体包装100mg
肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体免疫球蛋白G(IgG)Torezolid (TR-701; tedizolid) is a novel oxazolidinone for gram-positive infecti
DAPI溶液(5mg/ml)黑木耳 N-甲基-D-脯氨补体因子Bb检测试剂盒
黄杆 4-乙氧羰基-3-乙氧基补体因子D检测试剂盒
枯草芽孢杆 1-氯乙基环己基碳酸酯补体因子H检测试剂盒
柠檬形克勒克酵母 6-喹啉-2-酮不对称二甲基精氨酸检测试剂盒
球孢白僵 2-氯-3-三氟甲基-5-硝基吡啶层粘连蛋白检测试剂盒
Rhizobium alkalisoli 2-羟基-5-硝基-3-三氟甲基吡啶叉头框C2检测试剂盒
产肠素大肠埃希氏 7-硝基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐叉头型基因P3检测试剂盒
产朊假丝酵母 4-溴酮肠三叶因子检测试剂盒
苏云金芽孢杆 3-甲酸甲肠脂肪酸结合蛋白检测试剂盒
假单胞 四丁基氟氢铵超敏C蛋白检测试剂盒
粉状毕赤酵母 白屈菜酸超敏游离雌三检测试剂盒
灰树花G25 D-3-溴苯氨酸超氧化物歧化酶检测试剂盒
葡萄牙链霉 N-Boc-5-甲氧基沉默调节蛋白1检测试剂盒
谷糠乳杆 5-氨基间苯二甲酸二甲酯成骨生长肽检测试剂盒
秀珍菇 10-(2,5-二羟基苯基)-10H-9-氧杂-10-磷杂菲-10-氧化物成熟BNP检测试剂盒