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以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
100T | 1~3天 |
商品介绍:
Hoechst33342/PI双染细胞凋亡检测试剂盒是采用DNA探针双染细胞核的方法检测细胞的状态。Hoechst33342染色液A可以透过正常细胞膜,而细胞凋亡后,细胞膜对Hoechst33342染色液A的通透性增加,PI染色液B不能透过细胞膜,对正常细胞和凋亡细胞不能染色,而对坏死细胞可以染色。用两种染色液对细胞进行双染后,使用流式细胞仪或荧光显微镜即可对细胞状态进行检测。在双变量流式细胞仪的散点图上,这三群细胞表现分别为:正常细胞为低蓝色/低红色(A+/B+),凋亡细胞为高蓝色/低红色(A++/B+),坏死细胞为低蓝色/高红色(A+/B++)。 储存条件:A液和B液-20℃避光保存。C液2-8℃保存。 有效期:一年。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
苹果舒尼替尼英文名称: Clarithromycin 浓缩2复合亚基D3抗体包装500g
羟基脲英文名称: Clarithromycin 磷化分裂周期蛋白6抗体包装1g
曲美替尼英文名称: Clindamycin Phosphate磷化周期依赖激2抗体包装5g
塞卡替尼英文名称: Clindamycin Phosphate碳酐12抗体包装1g
三亚乙基硫代磷酰英文名称: Clofarabine泛载体蛋白R2抗体包装250mg
色瑞替尼,LDK378英文名称: Clotrimazole粘附分子3抗体包装5g
舒尼替尼碱英文名称: Clotrimazole整合相关蛋白CD47包装1g
顺铂英文名称: Colchlcine磷化角蛋白8抗体包装5g
司莫司汀英文名称: Colchlcine钙结合蛋白D28K抗体包装100g
他克莫司英文名称: Colistin Sulphate磷化接头蛋白CrkL抗体包装100g
他米巴罗汀英文名称: Colistin Sulphate磷化接头蛋白CrkL抗体包装25g
坦度替尼;MLN518英文名称: Eflornithine HCl促肾上腺皮质释放激受体1抗体包装500g
坦西莫司, 西罗莫司脂化物英文名称: Cromolyn sodium磷化丝切蛋白抗体包装1g
替拉替尼英文名称: Cromolyn sodium皮层肌动蛋白抗体包装5g
替莫唑英文名称: Cyclosporine A促肾上腺皮质释放激受体2抗体包装25g
ATCC-VR31资源名称: 人埃柯病毒 质量规格:HPLC含量测定胰岛样生长因子2 mRNA结合蛋白2试剂盒异香兰;Isovanillin
AS2.541资源名称: 酿酒酵母 质量规格:>97.0%,BR胰岛样生长因子1受体试剂盒原阿片碱;Protopine
异常汉逊酵母异常变种Hansenula│anomala var. anomala 质量规格:>98.5%,BR胰岛样生长因子1试剂盒异龙脑;DL-Isoborneol
Hoechst33342/PI双染试剂盒黄曲霉 D730大孔径强碱性阴离子树脂脂肪分化相关蛋白Elisa
冬菇 美洛培南三水合物钙;钙调蛋白依赖性蛋白激1DElisa
屎肠球 铜铁试剂一氧化氮Elisa
短小芽孢杆 更名不慌供应 铬片热休克70kDa蛋白12AElisa
绒边胶盘孢 硫酸钛热休克蛋白Elisa
大豆拟茎点种腐病 XDA-1B大孔树脂磷酸甘油酸变位5Elisa
杏鲍菇 水溶性霍霍巴油淀粉样蛋白Elisa
肺形侧耳 吡咯喹啉醌组氨酸Elisa
大肠埃希氏 7,8-二羟基黄酮单纯疱疹病1抗体Elisa
枯草芽孢杆 硬脂酰乳酸钠巨噬集落激因子Elisa
枯草芽孢杆 甜橙油转化生长因子Elisa
小红酵母 20-120kDa预先染色分子量MARK丝裂原活化蛋白激1Elisa
枯草芽孢杆 胎牛血清500ml/XQ-B0500二酸单酰Elisa
球形节杆 胎牛血清100ml/XQ-B0100间接胆红Elisa
米曲霉 胎牛血清50ml/XQ-B0050朊病蛋白Elisa