R&D/美国 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
产品详细介绍:
本PCR试剂盒带有Taq DNA Polymerase、PCR buffer、dNTP和上样缓冲液,自备模板和引物即可进行PCR反应,适合用于普通的PCR或RT-PCR定性或定量检测,也可以用于不太长的的DNA片段的克隆。 Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶,95℃孵育时的半衰期大于40分钟。Taq酶的分子量为94kDa。Taq酶可以催化5'至3'方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。Taq酶没有3'至5'的外切酶活性,有非常低的5'至3'外切酶活性。由于Taq酶没有3'至5'的外切酶活性,因此在DNA聚合过程中相当于核苷酸转移酶的作用,终会导致PCR产物的3'末端会产生3'-dA overhangs,即产生带一个A的3'粘端。本Taq DNA Polymerase为重组酶,通过大肠杆菌表达纯化获得,和纯化获得的天然Taq DNA Polymerase在各方面的性质相同。 保存:-20℃ |
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
Universal PCR Kit with Taq | 20μL×400次|20μL×2000次 | GOY-F10283 |
DNA提取流程图:
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
人单胺氧化酶(MAO)ELISAKit Timosaponin B-II 136656-07-0 中文名:知母皂苷B-II 分子式:C45H76O19
人补体因子4(C4)酶联吸附测定试剂盒 Human C4 (Compleme Compone 4) ELISA Kit 3,6'-Disinapoylsucrose 中文名:3,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19 度:98.0%
人表皮转谷酰胺酶(TGM3)酶联吸附测定试剂盒 Human TGM3 (ansglaminase 3, Epidermal) ELISA Kit 3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan 915095-94-2 中文名: 分子式:C17H16ClIO2
人白介素27(IL-27)酶联吸附测定试剂盒 Human IL-27 (Ierleukin 27) ELISA Kit 3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal 中文名: 分子式:C21H16FNO 度:98.0%
人α2巨球蛋白elisa试剂盒 人α2巨球蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 人α2巨球蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人α2巨球蛋白试剂盒、人α2巨球蛋白elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole 中文名: 分子式:C5H9N3O
雷公藤内酯甲(标准品) Wilforlide A 质量规格:HPLC≥98%,标准品 英文名称RatAngiogeninELISAKit大鼠血管生长素(Angiogenin)规格:96T/48T
连翘酯苷E(标准品) Forsythoside E 质量规格:HPLC≥98%,标准品 果菜比色法定量检测试剂盒20
罗通定/左旋延胡索乙素/左旋四氢巴马汀(标准品) Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 ELISAKitNOS人合成酶规格:48T/96T
表没食子儿茶素没食子酸酯(标准品) EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea Extract 质量规格:HPLC≥99%,标准品 小鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒 ,英文名: MMP-7 ELISA Kit
去氧胆酸(标准品) Deoxycholic acid 质量规格:HPLC≥98%,标准品 大鼠骨胶原交联(Cr)ELISA检测试剂盒RatCrosslaps,CrELISAKit 96T/48T
钙黄绿素乙酰甲酯 Calcein-AM 质量规格:>95%,美国进口原装 人敏C反应蛋白(hs-CRP)试剂盒 Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit
(标准品) Nicotinamide 质量规格:HPLC≥99.5%,标准品 Ratthioredoxieductase,xRELISAKit大鼠硫氧还蛋白还原酶(xR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
雪胆素甲(标准品) cucurbitacins 质量规格:HPLC≥98%,标准品 LAMBDA噬菌体DNA分离试剂盒10
5-羟色胺酸(标准品) 5-Hydroxytryptophan(5-HTP) 质量规格:HPLC≥98%,标准品 PlaVitaminD,VDELISA试剂盒植物D(VD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
5-羟色胺酸(5-HTP) 5-Hydroxytryptophan 质量规格:>98%,混旋 小鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA 试剂盒
通用型PCR试剂盒组织苹果酸酶(malic enzyme)活性比色法定量检测试剂盒
细胞苹果酸酶(Malic enzyme)活性比色法定量检测试剂盒
胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine γ-lyase;CGL)活性比色法定量检测试剂盒
植物胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性荧光定量检测试剂盒
真菌/酵母胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性荧光定量检测试剂盒
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。