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木丝霉PCR检测试剂盒品牌使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
木丝霉PCR检测试剂盒品牌 | 50T | PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
自备物品:
木丝霉PCR检测试剂盒品牌15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
乙环唑分子式:328.19分子量: C14H15Cl2N3O2英文名称:Ethylene loopCAS号:60207-93-4
5-喹啉分子式:144.17分子量: C9H8N2英文名称:5- amino groupCAS号:611-34-7
愈创木酚英文名称:GuaiacolCAS号:32994分子式:124.13分子量: C7H8O2
2,4-二硝氟分子式:186.1分子量: C6H3FN2O4英文名称:2,4- two FluoronitrobenzeneCAS号:70-34-8
2-溴噻唑分子式:164.02分子量: C3H2BrNS英文名称:2- thiazole bromideCAS号:3034-53-5
十九英文名称:Nineteen acidCAS号:646-30-0分子式:298.5分子量: C19H38O2
4,6-二羟-5-甲氧嘧分子式:142.11分子量: C5H6N2O3英文名称:4,6- two hydroxy -5-CAS号:5193-84-0
酞菁锡(II)英文名称:Tin phthalocyanine (II)CAS号:15304-57-1分子式:631.25分子量: C32H16N8Sn
碱性品绿英文名称:Basic greenCAS号:569-64-2分子式:364.91分子量: C23H25ClN2
五味子甲英文名称:The fruit of FructusCAS号:58546-54-6分子式:416.46422分子量:C23H28O7
6-溴喹啉分子式:208.06分子量: C9H6BrN英文名称:6- bromideCAS号:5332-25-2
木丝霉PCR检测试剂盒品牌SDHA 琥珀酸脱氢酶复合体亚基A抗体 0.2ml
phospho-CDKN1B/P27kip1 (Ser10) 磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂 0.1ml
Phospho-Stathmin (Ser16) 磷酸化原癌基因蛋白18抗体 0.1ml
Acetyl-Histone H2A(K5) 乙酰化组蛋白H2A抗体 0.1ml
Rab25 癌基因RAS相关蛋白Rab25抗体 0.2ml
phgophs-ATG4C(Ser451) 磷酸化自噬相关蛋白4C抗体 0.1ml
Galc 半乳糖脑苷脂酶抗体 0.1ml
CRF/CRH 促肾上腺皮质激素释放因子抗体 0.1ml
DEK DEK癌基因结合蛋白 0.1ml
NT-4/NT-5 神经生长因子4/5抗体 0.1ml
IL-6 (NT) 白介素6抗体(N端) 0.1ml
GDNF 胶质细胞源性神经营养因子抗体 0.1ml
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。