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样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
牛免疫缺陷病毒(BIV)核酸检测试剂盒图片 | 48T | PCR检测试剂盒 |
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
间甲酚英文名称:M-cresolCAS号:108-39-4分子式:108.14分子量: C7H8O
异硫荧光素(FITC)英文名称:Fluorescein isocyanate (FITC)CAS号:27072-45-3分子式:389.38分子量: C21H11NO5S
孕诺酮英文名称:Pregnant womenCAS号:2137-18-0分子式:316.43分子量: C20H28O3
7-溴-5-氯-8-羟喹啉分子式:258.5分子量: C9H5BrClNO英文名称:7- -5- chloride -8-CAS号:7640-33-7
2-硫脲嘧分子式:128.14分子量: C4H4N2OS英文名称:2- thioureaCAS号:141-90-2
霉能灵分子式:411.74分子量: C17H13Cl3N4S英文名称:Mei NenglingCAS号:86598-92-7
水溶性四氮唑分子式:分子量:英文名称:水溶性四氮唑CAS号:
2-氯-3-吡分子式:138.55分子量: C6H3ClN2英文名称:2- chloro -3- cyanopyridineCAS号:6602-54-6
十一英文名称:Eleven acidCAS号:112-37-8分子式:186.29分子量: C11H22O2
2-氯-5-甲分子式:252.48分子量: C7H6ClI英文名称:2- chloride -5-CAS号:116632-41-8
5-氯并三氮唑分子式:153.57分子量: C6H4ClN3英文名称:5- three nCAS号:94-97-3
牛免疫缺陷病毒(BIV)核酸检测试剂盒图片CDX2/3 尾侧型同源转录因子2/3抗体 0.2ml
ERG25 甲基固醇羟化酶单加氧酶1抗体 0.2ml
Rabbit Anti-Monkey IgM 兔抗猴IgM 1mg
Persephin PSP抗体 0.1ml
PACAP-27/38 腺苷酸环化酶激活肽-27/38抗体 0.1ml
phospho-HOMER3(Thr36) 磷酸化HOMER3蛋白抗体 0.1ml
HIPK2 Fas相互作用蛋白激酶2抗体 0.2ml
DYRK3 双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶3抗体 0.2ml
ADCY1 腺苷酸环化酶1抗体 0.2ml
Cathepsin S 组织蛋白酶S抗体 0.2ml
phospho-Cyclin E(Thr395) 磷酸化周期素E抗体 0.1ml
S100-A9/MRP14/CFAG/Calgranulin B S100A9抗体 0.1ml