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样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
马流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸检测试剂盒方法 | 48T | PCR检测试剂盒 |
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
2-羟吡分子式:95.1分子量: C5H5NO英文名称:2- hydroxy pyridineCAS号:142-08-5
4-分子式:161.25分子量: C11H15N英文名称:4- phenylpiperidineCAS号:771-99-3
汉防己乙素英文名称:FangchinolineCAS号:436-77-1分子式:608.7233分子量:C37H40N2O6
N'-异丙亚-2-硝磺酰分子式:257.27分子量: C9H11N3O4S英文名称:N'-, -2-, theCAS号:6655-27-2
N-(5--2-甲)-4-(3-吡)-2-嘧分子式:277.32分子量: C16H15N5英文名称:N- (5-) -4- (-2-) -2- (3-)CAS号:152460-10-1
酮康唑分子式:531.43分子量: C26H28Cl2N4O4英文名称:Tong KangzuoCAS号:65277-42-1
丹参酚A英文名称:Salvia miltiorrhiza phenolic acid ACAS号:96574-01-5分子式:494.447分子量:C26H22O10
[1,3-双(2,6-二异丙)咪唑-2-甲叉](1,3-二-1,3-丙二酮)铜分子式:675.4分子量: C42H47CuN2O2英文名称:【3双(2,6-二异丙)咪唑- 2 -甲叉](1,3 -二-1,3-丙二酮)铜CAS号:920739-11-3
TTC英文名称:TTCCAS号:分子式:334.8分子量: C19H15ClN4
3,4-二羟甲分子式:124.14分子量: C7H8O2英文名称:3,4- two hydroxy tolueneCAS号:452-86-8
4-叔丁吡分子式:135.21分子量: C9H13N英文名称:4- tert butyl pyridineCAS号:3978-81-2
马流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸检测试剂盒方法VSV-G tag VSV-G tag标签抗体 0.1ml
TNFAIP8 肿瘤坏死因子α诱导蛋白8抗体 0.2ml
CK II beta 丝/苏氨酸蛋白激酶II β抗体(casein kinase IIβ) 0.1ml
AP-TNAP/ALPL 碱性磷酸酶抗体 0.1ml
Anei-ATX/Autotaxin 自分泌运动因子抗体 0.1ml
PAGE1 前列腺相关P抗原家族成员1抗体 0.2ml
C20ORF141 20号染色体开放阅读框141抗体 0.2ml
MEI-1 减数分裂缺陷蛋白1抗体 0.2ml
Glycerol kinase 甘油激酶抗体 0.2ml
CHRDL2 乳腺肿瘤新因子1抗体 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗马IgM 0.1ml
CCR8 细胞表面趋化因子受体8抗体 0.1ml