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肠道病毒EV71核酸检测试剂盒图片使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
肠道病毒EV71核酸检测试剂盒图片 | 48T | PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
2,6-氯-3-吡分子式:273.89分子量: C2H2Cl2IN英文名称:2,6- chloride -3-CAS号:xv12
(钯试剂)4-(8-羟-5-喹啉偶氮)萘磺英文名称:(palladium reagent) 4- (8- hydroxy -5-) naphthalene sulfonic acidCAS号:26644-96-2分子式:379.39分子量: C19H13N3O4S
5-氯-2-硝三氟甲分子式:225.55分子量: C7H3ClF3NO2英文名称:5- -2- nitro threeCAS号:118-83-2
2,5-二氯吡分子式:147.99分子量: C5H3Cl2N英文名称:2,5- twoCAS号:16110-09-1
酞菁蓝B英文名称:Phthalocyanine blue BCAS号:147-14-8分子式:576.08分子量: C32H16CuN8
1,3,5-三(三氟甲)分子式:282.11分子量: C9H3F9英文名称:1,3,5- three (three f) benzeneCAS号:729-81-7
2,6-二氟甲分子式:128.12分子量: C7H6F2英文名称:2,6- two fCAS号:443-84-5
派派分子式:149.131分子量: C10N2H英文名称:Group of radicalsCAS号:4897-50-1
柚皮素英文名称:NaringeninCAS号:480-41-1分子式:272.25278分子量:C15H12O5
3,4-二氯硝分子式:192分子量: C6H3Cl2NO2英文名称:3,4- twoCAS号:99-54-7
4-联氧磷二酯英文名称:4- two phenyl phosphate esterCAS号:17269-99-7分子式:402.38分子量: C24H19O4P
肠道病毒EV71核酸检测试剂盒图片MYLIP/Idol 低密度脂蛋白受体的诱导降解蛋白抗体 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗猪IgG 0.1ml
Mouse Anti-rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的小鼠抗兔IgG 0.1ml
TIMP-1(NT) 金属蛋白酶组织抑制因子-1抗体(N端) 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Cy5 Cy5标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
phospho-BAD(Ser75) 磷酸化相关死亡促进因子抗体 0.1ml
CENPB 着丝粒蛋白B抗体 0.2ml
phospho-APP/ABPP (Ser730) 磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体 0.1ml
Complement C3 beta chain 补体C3b抗体 0.1ml
BAGE4 肿瘤/抗原2.4抗体 0.2ml
Goat Anti-rat IgG/Bio 生物素标记的羊抗大鼠IgG 0.1ml
Synaptopodin 突触极蛋白synaptopodin抗体 0.1ml
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。