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样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
传染性胃肠炎病毒(PTGV)核酸检测试剂盒方法 | 48T | PCR检测试剂盒 |
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
生根粉英文名称:Rooting powderCAS号:9873982分子式:分子量:
1-苄-4-分子式:190.28分子量: C12H18N2英文名称:1- benzyl -4- piperidineCAS号:50541-93-0
(S)-3-甲酸甲酯盐酸盐分子式:165.61798分子量: C6H12ClNO2英文名称:(S) -3- methyl piperidine hydrochlorideCAS号:
3,6-二咔唑分子式:197.24分子量: C12H11N3英文名称:Two 3,6- aminocarbazoleCAS号:86-71-5
灭幼脲英文名称:Juvenile ureaCAS号:57160-47-1分子式:309.151分子量: C14H10Cl2N2O2
荭草苷英文名称:OrientosideCAS号:28608-75-5分子式:464.376分子量:C21H20O12
4-(2-乙)吡分子式:122.17分子量: C7H10N2英文名称:4- (2- amino ethyl) pyridineCAS号:13258-63-4
间二氯分子式:147分子量: C6H4Cl2英文名称:Two - PCAS号:541-73-1
2,5-二氟溴分子式:192.99分子量: C6H3BrF2英文名称:2,5- two fluorine bromineCAS号:399-94-0
3-羟-6-甲吡分子式:109.13分子量: C6H7NO英文名称:3- hydroxy -6- methyl pyridineCAS号:1121-78-4
丙倍氯米松英文名称:BeconaseCAS号:1327543分子式:669.2分子量: C34H49ClO11
传染性胃肠炎病毒(PTGV)核酸检测试剂盒方法Rad17/RFC 细胞周期检控Rad17蛋白抗体(复制因子C) 0.1ml
Phospho-NPM (Ser4) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗体 0.1ml
ILT2/CD85j 细胞表面免疫球蛋白样转录因子2抗体 0.2ml
PLC β1/Phospholipase C beta 1 磷酯酶Cβ1抗体 0.2ml
CREPT 肿瘤高表达细胞周期相关蛋白抗体 0.2ml
PHAP1 蛋酸酶2A抑制剂1抗体 0.2ml
Secretin 分泌素抗体 0.1ml
phospho-FAK(Tyr925) 磷酸化粘着斑激酶抗体 0.1ml
RAB6B RAS癌基因相关蛋白RAB6B抗体 0.1ml
Phospho-mTOR (Thr2446) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗体 0.1ml
IL-4 白介素4抗体 0.1ml
Phospho-FoxO3a (Ser294) 磷酸化叉头蛋白3A抗体 0.1ml