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猪戊型肝炎病毒(HEV)核酸检测试剂盒方法使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
猪戊型肝炎病毒(HEV)核酸检测试剂盒方法 | 48T | PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
二甲亚砜-13C2分子式:80.15分子量: C2H6OS英文名称:Two methyl -13C2CAS号:136321-15-8
4-(二氟溴甲)溴分子式:分子量:英文名称:4- (Xiu Jiaji - two f)CAS号:2358-32-9
7-氯-4-羟-2-甲喹啉分子式:193.63分子量: C10H8ClNO英文名称:7- -4- hydroxy -2- methyl groupCAS号:15644-88-9
4-溴-3-硝三氟甲分子式:270分子量: C7H3BrF3NO2英文名称:4- -3- nitro threeCAS号:349-03-1
4,5-二氟酞腈分子式:164.11分子量: C8H2F2N2英文名称:4,5- two fluorine phthalocyanineCAS号:134450-56-9
并四咪唑分子式:252.34分子量: C15H12N2S英文名称:并四咪唑CAS号:885051-07-0
1-氯甲萘分子式:176.64分子量: C11H9Cl英文名称:1- methyl naphthaleneCAS号:86-52-2
重酸氢钾分子式:389.91分子量: KHI2O6英文名称:Potassium hydrogen carbonateCAS号:13455-24-8
溴代十六烷吡分子式:384.44分子量: C21H38BrN英文名称:Bromine sixteen alkyl pyridineCAS号:140-72-7
4,4'-二乙炔联分子式:202.26分子量: C16H10英文名称:4,4'- two acetylene baseCAS号:38215-38-2
3--5-甲吡分子式:118.14分子量: C7H6N2英文名称:3- cyano -5- methyl pyridineCAS号:42885-14-3
猪戊型肝炎病毒(HEV)核酸检测试剂盒方法SPHK1 鞘氨醇激酶1抗体 0.2ml
phospho-RPS6KA1(Ser363) 磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体 0.1ml
Metronidazole(1C2) 甲硝唑单克隆抗体 0.2ml
GADD45 gamma 生长抑制DNA损伤基因45γ抗体 GADD45γ 0.2ml
phospho-GNA12(Ser68) 磷酸化鸟苷酸调节蛋白12抗体 0.1ml
TRAP/Tartrate Resistant Acid Phosphatase 端粒酶调节相关蛋白抗体 0.1ml
C15orf52 15号染色体开放阅读框52抗体 0.2ml
C3a Receptor/C3aR 过敏毒素C3受体/补体C3受体抗体 0.2ml
S100A6BP/CACYBP 钙周期素结合蛋白抗体 0.2ml
Phospho-Zap-70(Tyr493) 磷酸化zeta相关蛋白70抗体 0.1ml
Layilin 透明质酸受体抗体 0.1ml
HSP47 热休克蛋白-47抗体 0.1ml
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。