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反应五要素:
沃尔巴克氏菌通用PCR检测试剂盒品牌参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
沃尔巴克氏菌通用PCR检测试剂盒品牌 | 50T | PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
自备物品:
沃尔巴克氏菌通用PCR检测试剂盒品牌15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
DL-α-Tocopherolmethoxypolyethyleneglycolsuccinatesolution英文名称:DL- -Tocopherol methoxypolyethylene glycol succinate solutionCAS号:1309573-60-1分子式:分子量:
辛酰分子式:158.24分子量: C8H18N2O英文名称:Xin XianjingCAS号:6304-39-8
精吡氟禾草灵英文名称:Fluazifop-p-butylCAS号:79241-46-6分子式:383.36分子量: C19H20F3NO4
龙胆苦苷英文名称:GentiopicrosideCAS号:20831-76-9分子式:356.33分子量:C16H20O9
DBD-ED分子式:285.32分子量: C10H15N5O3S英文名称:dbd-edCAS号:189373-41-9
四氢呋(THF)分子式:72.11分子量: C4H8O英文名称:Tetrahydrofuran (THF)CAS号:109-99-9
氟钛分子式:104.86分子量: F3Ti英文名称:Titanium fluorideCAS号:13470-08-1
(S)-3-四氢呋分子式:87.12分子量: C4H9NO英文名称:(S) -3- amino tetrahydrofuranCAS号:104530-79-2
四氯酞英文名称:Four + phthalideCAS号:27355-22-2分子式:271.9分子量: C8H2Cl4O2
苏木精英文名称:Su MujingCAS号:517-28-2分子式:302.28分子量: C16H14O6
2,4-二溴甲分子式:249.93分子量: C7H6Br2英文名称:2,4- dibromo tolueneCAS号:31543-75-6
沃尔巴克氏菌通用PCR检测试剂盒品牌Galectin 9 半乳糖凝集素9抗体 0.2ml
GPR55 蛋白偶联受体55抗体 0.2ml
Nox4/NADH NADPH氧化酶4抗体 0.1ml
Phospho-Rb(Ser795) 磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1抗体 0.1ml
AMFR/Gp78/RNF45 环指蛋白45/自分泌运动因子受体抗体 0.2ml
TSBP 特异蛋白抗体 0.2ml
ACA11 拟南芥ACA11抗体 1ml
TFE3 转录因子E3 0.1ml
RAIDD CASP2凋亡相关蛋白抗体 0.1ml
Pancreatic Amylase 胰淀粉酶抗体 0.1ml
TRAF3/CD40bp 肿瘤坏死因子受体相关蛋白3抗体 0.1ml
PTEN/MMAC1(CT) 一种肿瘤抑制基因抗体(C端) 0.1ml