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反应五要素:
新城疫病毒(NDV)核酸检测试剂盒图片多少钱参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
新城疫病毒(NDV)核酸检测试剂盒图片多少钱 | 48T | PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
自备物品:
新城疫病毒(NDV)核酸检测试剂盒图片多少钱15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
1-萘乙英文名称:1- NAACAS号:86-87-3分子式:186.21分子量: C12H10O2
溴-1-十六烷-3-甲咪唑分子式:387.44分子量: C20H39BrN2英文名称:-1- sixteen alkyl -3-CAS号:
3,3,4,4-四氯环丁砜分子式:257.951分子量: C4H4Cl4O2S英文名称:3,3,4,4- four chlorine SulfolaneCAS号:3737-41-5
4-巯吡分子式:111.16分子量: C5H5NS英文名称:4- thiolCAS号:4556-23-4
(S)-(-)-4,4'-双(二膦)-3,3'-二(1,2-亚甲二氧)分子式:610.59分子量: C38H28O4P2英文名称:(S) - (-) -4,4'- bis (two 1,2-) -3,3'- two (two)CAS号:210169-54-3
1-二十八烷英文名称:1- twenty-eight alkyl alcoholCAS号:67905-27-5分子式:410.75952分子量:C28H58O
番泻苷C英文名称:The CCAS号:71-16-2分子式:848.77分子量:C42H40O19
二水醛缩乙二胺钴分子式:325.23分子量: C16H14CoN2O2英文名称:Two salicylaldehyde ethylenediamine cobaltCAS号:14167-18-1
硫长春碱英文名称:Changchun sulfateCAS号:143-67-9分子式:909.05分子量:C46H58N4O9·H2SO4
O,O'-双(*硅烷)-5-氟尿嘧分子式:274.44分子量: C10H19FN2O2Si2英文名称:O, O'- bis (three methyl silane) -5-CAS号:17242-85-2
3-甲-4-硝吡唑分子式:127.1分子量: C4H5N3O2英文名称:3- methyl -4-CAS号:5334-39-4
新城疫病毒(NDV)核酸检测试剂盒图片多少钱FASN/Fatty Acid Synthase 1 脂肪酸合成酶抗体 0.1ml
SRXN1 硫氧还蛋白1抗体 0.2ml
Caspase-9 白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6抗体 0.1ml
S100A13 S100A13抗体 0.1ml
phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr198) 磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体 0.1ml
Phospho-LAT (Tyr171) 磷酸化T细胞活化连接蛋白抗体 0.1ml
KRAS 原癌基因K-ras抗体 0.1ml
phospho-SYN1(Ser62+Ser67) 磷酸化神经突触素1抗体 0.1ml
Collagen VII 7型胶原抗体 0.1ml
Dnmt3a DNA甲基转移酶-3α抗体 0.2ml
CNKSR3 Ras激酶抑制因子连接增强蛋白3抗体 0.2ml
Integrin β2/CD18/LFA-1 整合素β2抗体 0.1ml