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诺沃克病毒(NV)核酸检测试剂盒图片使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
诺沃克病毒(NV)核酸检测试剂盒图片 | 48T | PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
自备物品:
诺沃克病毒(NV)核酸检测试剂盒图片15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
三氯哒唑分子式:359.66分子量: C14H9Cl3N2OS英文名称:Three.CAS号:68786-66-3
钾分子式:138.55分子量: KClO4英文名称:Potassium perchlorateCAS号:7778-74-7
联苄唑分子式:310.4分子量: C22H18N2英文名称:Of theCAS号:60628-96-8
4-(1-吡咯烷)分子式:154.25分子量: C9H18N2英文名称:4 - (1- pyrrolidine) piperidineCAS号:1133904
5--4-溴-3-甲吡唑.氢酸盐分子式:256.93分子量: C4H7Br2N3英文名称:5- amino -4- bromo -3- dimethylpyrazole hydrobromide.CAS号:167683-86-5
1,1'-二庚-4,4'-二溴联吡鎓分子式:514.39分子量: C24H38Br2N2英文名称:1,1'- two -4,4'- heptyl bromide with pyridiniumCAS号:1555692
异补骨脂查尔酮英文名称:ISO bavachalconeCAS号:分子式:分子量:
茜素绿英文名称:Alizarin greenCAS号:4403-90-1分子式:622.58分子量: C28H20N2Na2O8S2
6-氯喹林分子式:163.6分子量: C9H6ClN英文名称:6- Lin chloroquineCAS号:612-57-7
5-溴-2-氟三氟甲分子式:243分子量: C7H3BrF4英文名称:5- -2- three fCAS号:393-37-3
1-(氯甲)-4-硝分子式:171.58分子量: C7H6ClNO2英文名称:-4- (1-) nitrobenzeneCAS号:100-14-1
诺沃克病毒(NV)核酸检测试剂盒图片Nicastrin 老年性痴呆蛋白APH2抗体 0.1ml
RNF35 环指蛋白35抗体 0.2ml
COX7A2 细胞色素c氧化酶VIIA亚型2抗体 0.1ml
HRAS/Ras/Ras p21 原癌基因H-ras抗体 0.1ml
Donkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的驴抗兔IgG 0.1ml
SODD Bcl2结合抗凋亡蛋白4抗体 0.2ml
Rabbit anti-MG IgG/Gold 胶体金标记的兔抗长爪沙鼠IgG 0.5ml
Glutamine PRPP amidotransferase 谷氨酰胺磷酸核糖基焦磷酸酰胺基转移酶 0.2ml
phospho-PTPN7(Ser93) 磷酸化非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗体 0.1ml
ADCY2 腺苷酸环化酶2抗体 0.2ml
IGF2BP2/IMP2 胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白2抗体 0.2ml
phospho-Cyclin E(Thr62) 磷酸化周期素E抗体 0.1ml
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。