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猪特定基因序列(Porcine)核酸检测试剂盒图片使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
猪特定基因序列(Porcine)核酸检测试剂盒图片 | 48T | PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
3,4-二羟酰分子式:168.15分子量: C7H8N2O3英文名称:3,4- two hydroxy phenyl hydrazineCAS号:39635-11-5
1-(3-)盐盐英文名称:1- (3- chlorophenyl) piperazine hydrochlorideCAS号:13078-15-4分子式:233.14分子量: C10H14Cl2N2
1,2-双-2,5-二异丙磷分子式:418.58分子量: C26H44P2英文名称:1,2- bis -2,5- twoCAS号:136705-65-2
R-甲吡分子式:分子量:英文名称:R- methyl pyridineCAS号:
2-二砜分子式:233分子量: C12H11NO2S英文名称:2- two phenyl groupCAS号:4273-98-7
2,6-二甲氧吡分子式:139.15分子量: C7H9NO2英文名称:2,6- two aCAS号:6231-18-1
葫芦素英文名称:GourdCAS号:7257-29-6分子式:分子量:
4-溴-3-羟甲吡分子式:分子量: C6H6BrNO英文名称:4- bromide -3-CAS号:197007-87-7
苍术素英文名称:AtractylodinCAS号:55290-63-6分子式:182.22分子量:C13H10O
1-(4-硝苄)咪唑分子式:203.2分子量: C10H9N3O2英文名称:1- (4- nitro group)CAS号:18994-90-6
2-羟-4-甲喹啉分子式:159.18分子量: C10H9NO英文名称:2- hydroxy -4- methyl groupCAS号:607-66-9
猪特定基因序列(Porcine)核酸检测试剂盒图片phospho-CDKN1A/P21 (Thr145) 磷酸化p21蛋白抗体 0.1ml
Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗体 1ml
Gas1 生长休止特定蛋白1抗体 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgM/Cy5 Cy5标记的兔抗鸡IgM 0.1ml
phospho-APBB1 (Ser347) 磷酸化铁蛋白Fe65抗体 0.1ml
Phospho-TrkA (Ser791) 磷酸化酪氨酸激酶A抗体 0.1ml
Ankyrin erythroid 红细胞蛋白Ank1抗体 0.2ml
BRD7 鼻咽癌相关转录调节蛋白抗体 0.2ml
NFKB p65 细胞核因子/k基因结合核因子抗体 0.1ml
phospho-JNK1/2/3(Thr183+Thr185) 磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗体 0.1ml
GDF3 生长分化因子3抗体 0.1ml
KMT8/Riz1/Riz2 转录因子GATA3结合蛋白G3B抗体 0.2ml
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。