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鹿特定基因序列(Deer)核酸检测试剂盒方法使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
鹿特定基因序列(Deer)核酸检测试剂盒方法 | 48T | PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
3-氯-4-吡分子式:138.55分子量: C6H3ClN2英文名称:3- chloro -4- cyanopyridineCAS号:68325-15-5
它勃宁英文名称:It 40CAS号:4429-63-4分子式:336.43分子量:C21H24N2O2
(R,R)-(+)-2,2'-异亚丙双(4-叔丁-2-恶唑啉)分子式:294.44分子量: C17H30N2O2英文名称:(R, R) - (+) -2,2'- isopropylidenebis (4- tert butyl -2- oxazolinyl)CAS号:131833-97-1
6,7-二甲氧豆素英文名称:6,7- two aCAS号:120-08-1分子式:206.1947分子量:C11H10O4
2-溴-3-硝吡分子式:202.99分子量: C5H3BrN2O2英文名称:2- -3- nitro pyridineCAS号:19755-53-4
3--4-甲氧三氟甲分子式:191.15分子量: C8H8F3NO英文名称:3- amino -4- three fCAS号:349-65-5
2-(甲氨)三氟甲分子式:175.15分子量: C8H8F3N英文名称:2- (methyl ammonia) three fCAS号:14925-10-1
6-甲氧-2-乙酰萘分子式:200.23分子量: C13H12O2英文名称:6- a -2- acetyl naphthaleneCAS号:3900-45-6
细胞染色剂黄绿素-AM英文名称:Cell stain calcein -AMCAS号:148504-34-1分子式:994.857分子量: C46H46N2O23
氯木兰花碱英文名称:Chlorinated MagnoliaCAS号:分子式:377.86186分子量:C20H24ClNO4
天青A英文名称:Azure ACAS号:37247-10-2分子式:625.68分子量: C16H18N3S · C15H1<
鹿特定基因序列(Deer)核酸检测试剂盒方法CCL17/ABCD2 胸腺活化调节趋化因子抗体 0.1ml
Adenylate kinase 2/AK2 腺苷酸激酶1抗体 0.2ml
FMDV Polyprotein (VP1 protein) 口蹄疫病毒A型抗体(N端) 0.2ml
MTNR1A/MTR-1A/MEL-1A-R 褪黑素受体1A/松果体素受体1A抗体 0.1ml
IL-2 白介素2抗体 0.2ml
LIMS1 整合素和生长因子样蛋白1抗体 0.1ml
TXNRD1 硫氧环蛋白还原酶1抗体 0.2ml
HURP/DAP5 肝癌上调蛋白抗体 0.2ml
FAIM3 FAS凋亡抑制分子3抗体 0.2ml
phospho-ATXN1(Ser775) 磷酸化失调症蛋白1抗体 0.1ml
NANOGP8 干细胞转录因子NANOGP8抗体 0.2ml
C19orf46 19号染色体开放阅读框46抗体 0.2ml
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。