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样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
马铃薯特定基因序列(PATA)核酸检测试剂盒图片 | 48T | PCR检测试剂盒 |
自备物品:
15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
三氟乙酰丙酮酸铝(III)分子式:486.22分子量: C15H12AlF9O6英文名称:Three acetyl pyruvate (III)CAS号:14354-59-7
水溶胺兰英文名称:Water soluble aniline blueCAS号:分子式:分子量:
4-(1-溴代乙)-5-氟-6-氯嘧分子式:239.47分子量: C6H5BrClFN2英文名称:4- (1-) -5- -6-CAS号:188416-28-6
407有机载体英文名称:407 organic carrierCAS号:分子式:分子量:
卡比唑分子式:186.23分子量: C7H10N2O2S英文名称:卡比唑CAS号:22232-54-8
二羟乙酸铝分子式:135.05分子量: C2H6AlNO4英文名称:Two hydroxy amino acidCAS号:13682-92-3
聚二甲硅烷担载的钯/氧铝混合催英文名称:Mixed catalysis of palladium / alumina supported by poly two methyl silaneCAS号:P2280分子式:分子量:
甲橙皮甙英文名称:MethylhesperidinCAS号:11013-97-1分子式:624.59分子量:C29H36O15
锰酸钾分子式:197.13分子量: K2MnO4英文名称:Potassium manganateCAS号:10294-64-1
无花果蛋白酶英文名称:Fig proteaseCAS号:819分子式:分子量:
氟虫腈砜分子式:453.15分子量: C12H4Cl2F6N4O2S英文名称:Fluoride, aCAS号:120068-36-2
马铃薯特定基因序列(PATA)核酸检测试剂盒图片Mouse Anti-human IgG/FITC FITC标记的小鼠抗人IgG 0.3ml
phospho-RPH3AL(Ser234) 磷酸化Ras相关GTP结合蛋白抗体 0.1ml
PP2A beta/PPP2CB 蛋白质磷酸酶2B抗体 PP2A β PP2A-β 0.1ml
fowl typhoid and pullorum disease 鸡白痢、鸡伤寒抗体 0.2ml
DLL4/Delta 4 Notch信号通路Delta样配体4抗体 0.1ml
RNF149 环指蛋白149抗体 0.2ml
Mouse Anti-human IgG/Bio 生物素标记的小鼠抗人IgG 0.1ml
MAP2/MAP-2a.b.c 微管相关蛋白2抗体 0.1ml
PLK1 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Plk1抗体 0.1ml
MMP-7 基质金属蛋白酶-7抗体 0.1ml
CUEDC2/CUE domain containing 2 CUE结构域蛋白2抗体 0.2ml
HDLBP/vigilin 高密度脂蛋白结合蛋白抗体 0.2ml